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Identificacao e caracterizacao de algumas proteinas com modificacoes pos-traducionais em celulas de linfoma humano.

Processo: 06/54305-3
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Mestrado
Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2006
Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2008
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
Pesquisador responsável:Lewis Joel Greene
Beneficiário:Germano Aguiar Ferreira
Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Proteômica   Processamento de proteína pós-traducional
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Linfoma De Celulas Do Manto | Modificacoes Pos-Traducionais | Proteomica

Resumo

O dogma central da biologia molecular preconizava que um gene codificava apenas uma proteína, mas agora compreendemos que modificações pós-transcripcionais e modificações pós-traducionais (MPT's) como splicing de RNA e de proteínas, entre outras, permitem que famílias de proteínas similares mas não idênticas, sejam obtidas a partir de um único gene, poupando à célula energia e material genético. Estudos no nosso laboratório mostraram que 30 a 40% das proteínas identificadas de células dendríticas imaturas e maturas e de melanoma humano estão presentes em múltiplas formas eletroforéticas com diferentes pontos isoelétricos e/ou pesos moleculares. O Linfoma de Células do Manto (LCM) já vem sendo investigado por colegas do Centro de Terapia Celular de Ribeirão Preto em estudos de expressão gênica e vias de sinalização e efeito do miR155 na expressão gênica. O objetivo do presente projeto é identificar e caracterizar diferentes proteínas da linhagem GRANTA 519 de LCM que tenham passado por MPT's, no sentido de identificar novas estruturas e funções de MPT's e aumentar e complementar os estudos sobre este linfoma. Extratos celulares contendo proteínas solúveis serão fracionados através de eletroforese bidimensional em faixas de pl de 4-7 ou 4-10 seguidas de coloração com comassie. Anticorpos, western blot, degradação N-terminal de Edman, MALDI-TOF/MS, assim como ESI/MS serão utilizados para a identificação e determinação da MPT na cadeia de aminoácidos. (AU)

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