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Caracterizacao dos efeitos da superexpressao de um segmento estrutural da cauda das miosinas va e vc sobre a apoptose.

Processo: 01/12831-7
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Mestrado
Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2002
Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2003
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Enilza Maria Espreafico
Beneficiário:Daniela Dover de Araujo
Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Melanoma   Centrossomos   Fosforilação   Anoikis
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Anoikis | Centrossomo | Fosforilacao | Melanoma Maligno | Miosina V | Motise

Resumo

Os objetivos centrais do presente projeto são estudar os mecanismos moleculares do envolvimento das miosinas V na progressão mitótica, no fenômeno de anoikis e na progressão tumoral em melanoma maligno, postulado neste projeto. Propomos analisar o grau de fosforilação e tipo de resíduo fosforilado da miosina-Va em células de diferentes estágios da progressão tumoral, em células de melanoma sincronizadas em diferentes estágios do ciclo celular, bem como em células impedidas de aderir ao substrato ou cultivadas sob estímulos hormonais (alfa-MSH e PGDF). A abordagem utilizada será a de imunoprecipitação ou "pull-down" para isolamento da miosina-Va endógena ou domínio estrutural etiquetado introduzidos em células por transfecção. Simultaneamente à análise da fosforilação, propomos identificar proteínas associadas à cadeia pesada de miosina-V. Utilizaremos anticorpos específicos para sondar a integrína alfa-v-beta-3 e proteínas previamente descritas como associadas à miosina-Va, como por exemplo, a DLC2, a Bmf e a melanofilina. As abordagens de marcação metabólica radioativa e autorradiografia do gel de eletroforese serão utilizadas para identificação de possíveis novos candidatos à interação com as miosinas V. (AU)

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Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
ARAUJO, Daniela Dover de. A expressão de um segmento estrutural do domínio cauda das miosinas Va e Vc, em células do melanoma B16, afeta a viabilidade celular. 2003. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.