Identificacao de troponinas i mutantes expressas com 5-hidroxitriptofano sensiveis as interacoes com os demais componentes do filamento fino.

• Processo: 98/05872-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 1998
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2001
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Fernando de Castro Reinach
• Beneficiário: Deodoro Camargo Silva Gonçalves de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/04527-3 - Regulacao da contracao muscular: mutantes sitio-dirigidos dos componentes do sistema contratil de musculo e sua analise "in vitro" e "in vivo"., AP.TEM
• Assunto(s): Fluorescência 5-Hidroxitriptofano Troponina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fluorescencia | Troponina | 5-Hidroxitriptofano

Resumo

Troponina I (Tnl) é a subunidade inibitória do complexo troponina. O complexo troponina é responsável pela regulação cálcio dependente da contração nos músculos, esqueléticos. A ligação de cálcio na troponina C modifica as interações entre as subunidades do complexo troponina e deste com o filamento de actina-tropomiosina removendo a inibição. Pretendemos construir mutantes fluorescentes de Tnl para monitorar as interações entre a Tnl e as demais proteínas do filamento fino. As propriedades fluorescentes do triptofano (Trp) e do 5-hidroxitriptofano (5HW) permitem que eles sejam utilizados como sondas intrínsecas da proteína. Por mutação sítio dirigida podemos inserir codons para o Trp em posições de interesse da Tnl. 5HW pode ser incorporado em proteínas recombinantes por uma E. coli auxotrófica para Trp. O 5HW pode ser excitado em comprimentos de onda que não excitam o Trp (310-320 nm), assim sua fluorescência pode ser detectada na presença de um vasto excesso de Trp. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

OLIVEIRA, Deodoro Camargo Silva Gonçalves de. Construção e análise de mutantes fluorescentes da troponina I. 2001. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.