Construcao e caracterizacao de mutantes de leishmania superexpressores constitutivos de gfp sem marcadores de selecao.

• Processo: 06/01274-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Angela Kaysel Cruz
• Beneficiário: Monica Cristina Terrão
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Recombinação homóloga Leishmania Transfecção
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Leishmania Spp | Recombinacao Homologa | Rna Ribossomal | Transfeccao | Parazitologia

Resumo

O parasita Leishmania tem importantes conseqüências clínicas e econômicas emmuitas partes do mundo, com dois milhões de novos casos de leishmaniose humana todosos anos. Endêmica na América do Sul, Leste da África, Oriente Médio e Índia, aleishmaniose representa sério risco para um décimo da população mundial. Não existindovacina, o tratamento é realizado por administração de compostos antimoniais, pentamidina,anfotericina ou miltefosina e todas elas apresentam alto nível de toxicidade.A necessidade urgente de testes em grande escala para uma droga anti-Leishmaniaremete à criação de uma linhagem de Leishmania que seja facilmente visualizada emonitorada. Neste contexto, este projeto tem como objetivo criar um transfectante deLeishmania que carregue o gene que codifica para a Proteína Fluorescente Verde (GFP –do inglês Green Fluorescent Protein) sem marcas de seleção que possam interferir emtestes com possíveis drogas anti-Leishmania.O gene será inserido no locus do RNA ribossomal, sob controle do promotor paraRNA polimerase I, o único que dirige expressão constitutiva e em altos níveis, no parasita.Serão comparadas as eficiências de promotores de Leishmania major e Leishmaniaamazonensis. Serão utilizadas linhagens de três espécies Leishmania major, Leishmaniadonovani e Leishmania braziliensis.