Identificacao e caracterizacao funcional dos elementos cis-regulatorios da miostatina.

• Processo: 06/05375-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2007
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Lúcia Elvira Álvares
• Beneficiário: Carla Vermeulen Carvalho Grade
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia do desenvolvimento Miostatina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Elementos Cis Regulatorios | Familia Tgf Beta | Fatores Transcricionais | Miostatina | Biologia do Desenvolvimento

Resumo

A proteína miostatina (ou GDF-8), membro da família de fatores de crescimento e transformação TGF-beta, é o principal modulador da deposição de musculatura esquelética nos vertebrados. Mutações no gene que codifica esta proteína têm sido associadas com um aumento dramático na massa dos músculos esqueléticos, tanto por hiperplasia quanto por hipertrofia. Por outro lado, concentrações elevadas da forma ativa da miostatina na corrente sanguínea estão associadas à caquexia que acompanha doenças como AIDS e o câncer, bem como o envelhecimento. Não obstante a sua importância, pouco se sabe sobre os mecanismos que regulam a atividade transcricional do gene que codifica a proteína miostatina. Por esta razão, a proposta deste trabalho é identificar e caracterizar funcionalmente os elementos cis-regulatórios do gene Miostatina de vertebrados amniotos (galinha, camundongo e humano). Para tanto, na primeira etapa deste projeto, será feita uma análise utilizando ferramentas de Bioinformática para identificar elementos conservados evolutivamente (RECs) nas regiões intergênicas adjacentes ao gene Miostatina, que possam representar elementos regulatórios. Programas específicos serão utilizados para localizar o promotor putativo do gene Miostatina. Potenciais sítios de ligação para fatores transcricionais conservados filogeneticamente serão localizados nos elementos cis-regulatórios putativos e categorizados quanto à classe e função. Na etapa subseqüente, os segmentos genômicos correspondentes ao promotor putativo e demais elementos cis-regulatórios serão amplificados por PCR e clonados em um vetor sem promotor, upstream à seqüência que codifica a luciferase, que será utilizada como gene-repórter. A habilidade dos possíveis elementos cis-regulatórios para dirigir a transcrição do gene-repórter será avaliada por transfecção de células C2C12, visando caracterizar funcionalmente tais elementos.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CARVALHO GRADE, CARLA VERMEULEN; SALERNO, MONICA SENNA; SCHUBERT, FRANK R.; DIETRICH, SUSANNE; ALVARES, LUCIA ELVIRA. An evolutionarily conserved Myostatin proximal promoter/enhancer confers basal levels of transcription and spatial specificity in vivo. DEVELOPMENT GENES AND EVOLUTION, v. 219, n. 9-10, p. 497-508, OCT 2009. (06/05375-9)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

GRADE, Carla Vermeulen Carvalho. Identificação e caracterização funcional dos elementos cis-regulatorios da miostatina. 2009. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.