Clonagem e expressão de proteínas imunogênicas de Bordetella pertussis e avaliação da resposta imunológica

• Processo: 06/59050-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia
• Pesquisador responsável: Vera Cristina Bugelli Cainelli-Gebara
• Beneficiário: Paulo Silva Wolf
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Bordetella pertussis Citocinas Imunogenicidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Adjuvantes | Bordetella Pertussis | Brka | Citocinas | Imunogenicidade | 60 Kda

Resumo

Nosso grupo tem trabalhado na avaliação das propriedades imunogênica e adjuvante de uma fração solúvel obtida da Bordetella pertussis. Duas proteínas foram purificadas e identificadas como uma proteína de 73 kDa (α-domínio N-terminal da proteína BrkA) e uma proteína “heat-shock” (HSP) de 60 kDa (BrkA e Cpn60). Ambas puderam induzir um aumento da produção de anticorpos contra os antígenos da bactéria. Nossa metodologia mostrou-se eficaz para a obtenção e purificação das duas proteínas da B. pertussis. Entretanto, embora o índice de recuperação tenha sido alto, a quantidade de proteínas efetivamente recuperada é pequena. Desse modo, este projeto propõe o isolamento dos genes destas duas proteínas a partir do DNA genômico, a clonagem e a expressão das proteínas recombinantes em Escherichia coli, para a obtenção de quantidades adequadas aos estudos in vivo e in vitro. Estes estudos visam avaliar em camundongos a resposta imune induzida pela imunização com as proteínas recombinantes. Os parâmetros de avaliação da resposta imune serão a produção de anticorpos, a caracterização dos isotipos preferencialmente induzidos e a produção de citocinas em células esplênicas dos animais imunizados. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

WOLF, Paulo Silva. Clonagem, expressão e avaliação da imunogenicidade e do potencial adjuvante induzidos pela proteína \heat-shock\  Cpn60 da Bordetella pertussis.. 2010. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.