Papel da arg127 na conformacao estrutural e secrecao do fator h, importante proteina reguladora da via alternativa do sistema complemento.

• Processo: 07/52953-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia
• Pesquisador responsável: Lourdes Isaac
• Beneficiário: José Antônio Tavares de Albuquerque
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Inflamação Imunidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Complemento | Fator H | Imunodeficiencia | Inflamacao

Resumo

A deficiência completa de Fator(F) H leva ao descontrole na formação da alça de amplificação da via alternativa, com excessiva ativação do complemento. Em virtude disto, indivíduos deficientes de FH apresentam uma maior suscetibilidade às infecções microbianas e ao desenvolvimento de síndrome hemolítico-urêmica e glomerulonefrite membrano-proliferativa. Nosso grupo estuda a deficiência dupla do componente C9 e de Fator H em uma criança, proveniente de família japonesa. Este paciente apresentou atividade hemolítica indetectável no soro, ausência de FH, C3 e níveis muito reduzidos de FB e C9. Empregando-se a microscopia confocal, confirmamos que os fibroblastos do paciente sintetizam e expressam epítopos de Fator H no citoplasma, contudo, não detectáveis no soro por Western blot ou mesmo por ELISA. Identificamos a existência de uma mutação responsável da Arg127 para His127. Sabemos que este aminoácido é extremamente conservado em diversas espécies e que a mesma Arg127, quando substituída por Leu127, foi associada à completa deficiência de Fator H em outro paciente (francês). Diante disso, propomo-nos a verificar a função desta Arg127 para a secreção do Fator H e, possivelmente, verificar em qual compartimento celular esta proteína está retida, a transfecção de mutantes de FH em células, a avaliação da secreção da proteína por essas células através da marcação metabólica e análise em microscopia confocal. Além disso, analisaremos a estrutura protéica, através dos ensaios de "overlay", fluorescência de proteína e dicroísmo circular, a fim de verificar se há alteração de conformação geral que explique esta deficiência. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

ALBUQUERQUE, José Antônio Tavares de. Papel da Arg127 na conformação estrutural e secreção de Fator H, importante proteína reguladora da via alternativa do sistema complemento. 2011. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.