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Metalômica comparativa de soja (Glicine max L. Merril) transgênica e não-transgênica empregando sistemas bidimensionais de separação

Processo: 08/03981-4
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de julho de 2008
Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2012
Área de conhecimento:Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica
Pesquisador responsável:Marco Aurelio Zezzi Arruda
Beneficiário:Lidiane Raquel Verola Mataveli
Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:06/07309-3 - Novas estratégias analíticas para estudos envolvendo biomoléculas, AP.TEM
Assunto(s):Metalômica   Espectrometria de massa por plasma acoplado indutivamente   Eletroforese em gel bidimensional   Soja   Métodos bioanalíticos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:HPLC bidimensional | Icp-Ms | metalômica | Soja | técnicas hifenizadas | 2D-Page | Bioanalítica

Resumo

Este projeto consiste na diferenciação, em termos metaloproteômicos, entre a soja transgênica (Glicine max L. Merril) e não transgênica. A determinação do metaloproteoma envolve técnicas de separação de alta resolução como a eletroforese bidimensional em gel de poliacrilamida (2D-PAGE) associada a processos microanalíticos, como a espectrometria de massas (MS). A eletroforese em gel, como única técnica de separação, apresenta, entretanto, inconvenientes e problemas intrínsecos, sendo muitas vezes necessária utilização de outras técnicas de separação. Dessa forma, o objetivo desse trabalho será ampliar as dimensões de separação das proteínas da soja. Para isso, será utilizada a cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), com posterior identificação e quantificação dos metais presentes nas mesmas utilizando espectrometria de massas com plasma acoplado indutivamente (ICP-MS). Inicialmente as proteínas da soja serão extraídas, sendo que três procedimentos serão testados para escolha do melhor, e, então, proteínas totais serão quantificadas pelo método de Bradford. Numa primeira fase do trabalho experimental, as separações cromatográficas das proteínas serão feitas utilizando-se apenas uma dimensão cromatográfica, i.e., cromatografia por exclusão (SEC). Após otimização desta, a segunda dimensão cromatográfica será incluída, cromatografia de fase reversa (RP), a fim de melhorar a capacidade de separação das proteínas. Por fim, as manchas (spots) digeridas do gel (2D-PAGE) serão analisadas pelo sistema ICP-MS.

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Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
MATAVELI, Lidiane Raquel Verola. Metalômica comparativa de soja [Glycine max (L.) Merrill] transgênica e não-transgênica utilizando sistema multidimensional de separação. 2013. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Química Campinas, SP.