Biogênese e perfil de expressão de microRNAs por microarranjo no sistema nociceptivo.

• Processo: 08/10091-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2009
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia
• Pesquisador responsável: Guilherme de Araújo Lucas
• Beneficiário: Ricardo Kusuda
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Neurofisiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Pkr | Proteína quinase dependente de RNA | Neurofisiologia

Resumo

A proteína-quinase ativada por RNA (PKR) é uma quinase serina/treonina ativadanão somente por células infectadas por vírus, que produzem e liberam RNA de fitadupla como produto da replicação viral, mas também por fatores tão diversos quantoestímulos pró-inflamatórios, fatores de crescimento, citocinas e estresse oxidativo. Aatividade de PKR encontra-se, por isso, associada à regulação de funções celulares tãodiferentes como diferenciação, transcrição, apoptose e crescimento celular. Neste projeto,investigaremos a participação de PKR nos mecanismos neurobiológicos da dor crônicadecorrente de lesão de nervo periférico e de doença inflamatória crônica.Os objetivos centrais do projeto são: (1) identificar o perfil de expressão do RNAmde PKR e de seu ativador endógeno, RAX, no gânglio da raiz dorsal e na coluna dorsalda medula espinal após lesão parcial de nervo periférico e durante processo inflamatóriocrônico; (2) investigar o estado de fosforilação da proteína PKR no gânglio da raiz dorsale na coluna dorsal da medula espinal em animais submetidos aos diferentes modelos dedor persistente; (3) caracterizar, em termos de neurotransmissão, as populaçõescelulares, no gânglio da raiz dorsal e na coluna dorsal da medula espinal, que expressama proteína PKR; (4) monitorar o efeito da lesão parcial de nervo periférico e de doençainflamatória crônica sobre a fosforilação de membros da família MAPK (ERK-1 e -2, p38e JNK), PP2A, eIF2alfa e IKK na coluna dorsal da medula espinal e no gânglio da raizdorsal de camundongos PKR-/- e seus respectivos controles PKR+/+; (5) monitorar odesenvolvimento de alodínia mecânica e hipernocicepção térmica em camundongosPKR-/- submetidos a lesão parcial de nervo periférico e de doença inflamatória crônica;(6) e avaliar o valor terapêutico da injeção intratecal de inibidor de PKR emcamundongos selvagens.Este projeto combinará métodos de biologia celular e molecular com paradigmasfarmacológicos e comportamentais a fim de investigar a ação de PKR em neurônios ecélulas da glia associadas ao desenvolvimento de alodínia e hipernocicepção emdiferentes modelos de dor crônica. Os resultados deste trabalho devem evidenciar novosmecanismos neurobiológicos que contribuam para o entendimento da fisiopatologia dador persistente de origem neuropática e inflamatória que possibilitem odesenvolvimento de estratégias terapêuticas mais eficazes no tratamento de condiçõestão debilitantes.