| Processo: | 09/02379-1 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Mestrado |
| Data de Início da vigência: | 01 de agosto de 2009 |
| Data de Término da vigência: | 31 de outubro de 2011 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos |
| Pesquisador responsável: | Marilis Do Valle Marques |
| Beneficiário: | Mirian Molnar Rodrigues |
| Instituição Sede: | Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Ferritinas Genética bacteriana |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | ferritinas | metabolismo de ferro | RNA regulatório | genética bacteriana |
Resumo Ferro é um micronutriente essencial aos organismos vivos, e as bactérias utilizam várias estratégias para a administração dos níveis deste metal. Dentre estas, utilizam proteínas intracelulares de estocagem de ferro (ferritinas) que permitem acesso ao metal quando este está em baixa quantidade e o controle de consumo de ferro é feito regulando a expressão destas ferritinas. Em muitas bactérias essa regulação do metabolismo de ferro é mediada pela proteína Fur em associação a ferro, agindo diretamente, ou indiretamente por meio de um pequeno RNA (sRNA). Este trabalho tem por objetivos o estudo de duas ferritinas e seus mecanismos regulatórios, incluindo a identificação em C. crescentus de um sRNA equivalente funcional ao pequeno RNA RyhB de E. coli. Serão realizadas a deleção dos genes codificantes das duas ferritinas e da região contendo o possível sRNA, e os fenótipos dos mutantes serão avaliados quanto ao metabolismo de ferro e resposta ao estresse oxidativo. Será feita uma análise da expressão dos genes das ferritinas e do sRNA em resposta à homeostase de ferro e ao estresse oxidativo, através da clonagem das regiões regulatórias dos genes à frente de um gene repórter de transcrição lacZ. Ensaios de expressão dos genes das ferritinas nos mutantes do sRNA, fur e oxyR permitirão definir a rede regulatória destes genes. Também serão feitos ensaios de expressão de outros genes de metabolismo de ferro no mutante de sRNA e avaliação do papel de cada ferritina no acúmulo de ferro. | |
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