Determinação dos fatores de transcrição e sinais celulares envolvidos na regulação do gene cspC.

• Processo: 09/12095-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Marilis Do Valle Marques
• Beneficiário: Juliana Santos Nakayama
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Regulação da expressão gênica Fases estacionárias Frio
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cold shock protein | CspC | fase estacionária | Frio | Regulação gênica

Resumo

As CSPs são proteínas de choque frio de baixo peso molecular e possuem um domínio que é conservado entre procariotos e eucariotos, denominado de domínio de choque frio (CSD). As CSPs se ligam ao RNA nascente evitando a formação de novas estruturas secundárias no mRNA, superando assim os efeitos deletérios sobre a tradução. C. crescentus, uma alfa-proteobactéria Gram-negativa, possui quatro genes que codificam proteínas de choque frio (cspA, cspB, cspC e CspD). CspA e CspB são as únicas induzidas no frio e apresentam um único domínio de CSD. CspC e CspD apresentam dois CSDs e são induzidas em fase estacionária. Embora muito se saiba sobre o processo de entrada em fase estacionária em E. coli e B. subtilis, muito pouco ainda é conhecido em alfa-proteobactérias. O estudo do papel e da expressão de CspC em fase estacionária em C. crescentus é importante para a compreensão dos processos que levam à adaptação à fase estacionária e à recuperação da fase de senescência. As abordagens propostas para identificar os fatores regulatórios de cspC são: a varredura de uma biblioteca de mutantes para identificar aqueles nos quais a expressão é diminuída e a identificação de proteínas que se ligam à região regulatória do gene. Serão também realizados ensaios de expressão em resposta a diferentes situações e quorum sensing utilizando uma fusão de transcrição com o gene repórter lacZ, e a expressão será avaliada por ensaios de atividade de beta-galactosidase.