Influência da sexagem de espermatozóide bovino por citometria de fluxo em diferentes variáveis espermáticas e embrionárias

• Processo: 10/00585-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Roberto Sartori Filho
• Beneficiário: José de Oliveira Carvalho Neto
• Instituição Sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Morfologia animal Expressão gênica Metilação Biotecnologia da reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: expressão gênica | metilação | Microscopia atômica | Morfologia | sêmen sexado | Biotecnologia da Reprodução

Resumo

O objetivo deste estudo é comparar diferentes características espermáticas entre sêmen sexado e não sexado e embriões produzidos com este sêmen. Serão utilizadas amostras de sêmen de quatro touros. Um ejaculado de cada touro será colhido e fracionado em três partes: não sexado (NS), sexado contendo espermatozoide X (SX) e sexado Y (SY). Para avaliação morfométrica da cabeça do espermatozoide serão feitas 100 imagens de células por amostra de todos os touros/tratamento através de microscopia de força atômica. As imagens serão avaliadas quanto ao volume, área, diâmetro máximo e rugosidade de membrana utilizando o software SPM Off-line. Padrão de metilação do DNA será avaliado na região diferencialmente metilada (DMR) do gene IGF2. Todo o procedimento será repetido três vezes. Embriões produzidos in vitro com este sêmen dos três tratamentos serão utilizados para avaliação do padrão de metilação e expressão gênica. Seis pools de 15 embriões de cada grupo serão formados. Destes pools, três serão utilizados para avaliação da expressão dos genes PLAC-8, KRT-8, Interferon-tau, MnSOD, Hsp-70, DNMT 3A, DNMT 3B, DNMT 1, Glucose Transporter (GLUT) 1, 2 e 3 por PCR em tempo real. Os três pools restantes serão utilizados para avaliação do padrão de metilação da DMR do gene IGF2 semelhante ao citado anteriormente. Além disto, será realizada a comparação entre os grupos quanto à capacidade de ligação dos espermatozóides sexados e não sexados com as células da tuba uterina, também realizada em três diferentes repetições. O tempo de viabilidade do espermatozoide SX, SY e NS em meio de fecundação também será avaliado. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CARVALHO, JOSE DE OLIVEIRA; SARTORI, ROBERTO; RODELLO, LEANDRO; MOURAO, GERSON BARRETO; BICUDO, SONY DIMAS; DODE, MARGOT A. N.. Flow cytometry sex sorting affects bull sperm longevity and compromises their capacity to bind to oviductal cells. LIVESTOCK SCIENCE, v. 207, p. 30-37, JAN 2018. (10/15054-0, 10/00585-0)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

CARVALHO NETO, José de Oliveira. Aspectos moleculares, estruturais e funcionais de espermatozoides bovinos sexados por citometria de fluxo. 2013. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALA/BC) Piracicaba.