Reprogramação de Células-Tronco Mesenquimais de Tecido Adiposo para Formação e Enriquecimento de Cardiomiócitos

• Processo: 10/03172-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sang Won Han
• Beneficiário: Bianca Ferrarini Zanetti
• Instituição Sede: Centro de Terapia Celular e Molecular. Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Células-tronco mesenquimais Enriquecimento Terapia baseada em transplante de células e tecidos Miócitos cardíacos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cardiomiócitos | células-tronco mesenquimais | Enriquecimento | Terapia Celular

Resumo

As doenças cardiovasculares são principais causas de óbitos em todo o mundo. A principal consequência destas doenças é a perda de tecido cardíaco, o que compromete a sua função. As células-tronco mesenquimais (CTM) têm sido usadas em terapia celular para isquemia cardíaca com a expectativa de sua diferenciação em cardiomiócitos, mas com pouco sucesso. Para que as CTM sejam usadas em terapia celular e engenharia tecidual, para tratar doenças cardiovasculares, serão necessários experimentos para validar a prova-de-princípio de genes candidatos à diferenciação em pró-cardiomiócitos. O primeiro objetivo deste projeto é estudar o papel de dois fatores de transcrição relacionados à fase inicial de desenvolvimento do miocárdio, GATA4 e Nkx2.5 em CTM de tecido adiposo com ou sem o agente demetilante 5'-azacitidina. O segundo objetivo do projeto é elaborar um sistema para identificar e enriquecer a população de cardiomiócitos diferenciados, para contornar a baixa taxa de diferenciação. Para isso, vetores lentivirais serão desenvolvidos com sequências de promotores de genes que são expressos especificamente em cardiomiócitos em diferentes fases de desenvolvimento, MLC-2v, MYH6, TNNT2, SERCA2a, ANP e CX43, para controlar a expressão de GFP e do gene de resistência a geneticina. Com isso, espera-se identificar os cardiomiócitos diferenciados pela presença de células GFP+ e o enriquecimento destas células por seleção positiva com geneticina. Ao longo da diferenciação e da identificação/ enriquecimento serão observados marcadores moleculares e funcionais para cardiomiócitos.