Influência da expressão da alfa-6 integrina na produção de SSC murinas transgênicas por lipofecção

• Processo: 10/04534-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: José Antonio Visintin
• Beneficiário: Robinson André Worst
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Transgenia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: alfa 6 integrina | Células tronco espermatogoniais | lipofecção | transgenia | Biotecnologias da Reprodução Animal

Resumo

Ao longo da vida reprodutiva dos machos adultos, espermatozóides são formados pelas células-tronco espermatogoniais (SSC, do inglês spermatogonial stem cells) por um processo conhecido como espermatogênese. Desde o momento em que células-tronco germinativas puderam ser manipuladas in vitro e produzir nascimentos, os recentes avanços das técnicas de cultivo abriram novas possibilidades para a transgenia da linha germinativa. As pesquisas atualmente desenvolvidas fazem uso das SSC, pois são um excelente modelo para compreender melhor a biologia das células-tronco adultas e os mecanismos que controlam as funções das SSC. Este projeto de pesquisa pretende estabelecer o cultivo e a modificação de SSC murinas para produção de animais transgênicos. As SSC murinas serão isoladas de testículos de camundongos com 5 a 10 dias de idade da linhagem C57Bl6, cultivadas in vitro, caracterizadas quanto sua morfologia, grau de diferenciação e expressão de alfa-6 integrina, a qual permitirá a purificação das SSC por triagem celular por fluorescência ativada. As SSC serão geneticamente modificadas com a inserção do gene GFP pela técnica de lipofecção e transplantadas em testículo de camundongos receptores. A verificação da integração será feita através de avaliações histológicas e constatação da fluorescência das SSC GFP+ transplantadas.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

WORST, Robinson André. Influência da expressão da alfa-6 integrina na produção de células-tronco espermatogoniais murinas transgênicas. 2012. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ/SBD) São Paulo.