Distribuicao da mva fosforilada e nao-fosforilada em compartimentos nucleares de celulas hela por imunolocalizacao.

• Processo: 07/52869-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Roy Edward Larson
• Beneficiário: Claudia Tavares dos Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Imunofluorescência Núcleo Células HeLa Fosforilação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celulas Hela | Fosforilacao | Imunofluorescencia | Misoina Va | Nucleo | Speckles Nucleares

Resumo

As miosinas são motores moleculares que executam seu movimento sobre os filamentos de actina. A miosina-Va é um membro da classe V de miosinas não-convencionais que está envolvido em intracelular transporte de organelas e RNA. A miosina-Va fosforilada em serina 1650 está localizada no núcleo celular associada à speckles, que são estruturas nucleares ricas em fatores de splicing responsáveis pelo processamento do pré-mRNA e estão localizados em regiões de intercromatina no nucleoplasma. Tendo em vista os dados recentes do laboratório demonstrando a localização da miosina-Va no núcleo de células de mamíferos, e quando fosforilada especificamente associada aos speckles, neste trabalho pretendemos refinar a determinação da localização da MVa em seu estado fosforilado vs não-fosforilado no núcleo de células HeLa, células modelos para a identificação de partículas e compartimentos nucleares. Para a execução deste trabalho serão utilizadas células HeLa, que são células derivadas de carcinoma cervical humano. Será realizada a purificação de anticorpo monoclonal 9E6 (imunoreativo para fosfo-serina1650-MVa) e sua marcação direta com sonda fluorescente, a ser utilizado em conjunto com outros anticorpos específicos para identificar os compartimentos nucleares envolvidos na distribuição da miosina-Va no núcleo. (AU)