Desenvolvimento de metodos por clae multidimensional para validacao do uso do biorreator de ggapdh de t.cruzi em triagem de inibidores em colecoes combinatorias.

• Processo: 06/01688-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Orgânica
• Pesquisador responsável: Quezia Bezerra Cass
• Beneficiário: Marcela Cristina de Moraes
• Instituição Sede: Centro de Ciências Exatas e de Tecnologia (CCET). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Reatores biológicos Inibidores Trypanosoma cruzi Gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (NADP+) Cromatografia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biorreatores | Gapdh | Imer | Inibidores | T.Cruzi | Cromatografia

Resumo

A identificação de candidatos a fármacos que se liguem especificamente a alvos biológicos é uma etapa crucial no processo de triagem de novos fármacos. Uma maneira rápida de se realizar a triagem de misturas de tais substâncias inibidoras é passá-las através de uma superfície na qual uma proteína (receptor, enzima) de interesse esteja imobilizada. De modo geral, os compostos que são mais fortemente retidos apresentam maior afinidade pela estrutura da proteína imobilizada, eluindo mais tardiamente do sistema e sendo, portanto, os melhores inibidores. O uso da cromatografia seletiva de afinidade como ferramenta investigativa das interações ligante-proteína e proteína-proteína pode fornecer dados diversificados, precisos e reprodutíveis sobre os aspectos chave dos sistemas biológicos, além de informações importantes sobre a afinidade das ligações, sobre o equilíbrio, e sobre as constantes cinéticas. A imobilização de enzimas em reatores capilares tem mostrado diversas vantagens, que incluem a necessidade de pequenos volumes de amostra, o aumento do tempo de vida e da estabilidade da enzima e sua reutilização. Essas vantagens são extremamente úteis para a realização de estudos enzimáticos on-line. Considerando a importância da gGAPDH no ciclo de vida do protozoário T. cruzi, e às significativas diferenças estruturais entre a gGAPDH e sua homóloga humana esta enzima tornou-se o alvo na busca por inibidores específicos para o tratamento da doença de Chagas. IMERs preparados com a enzima gGAPDH de T. cruzi serão utilizados na determinação da capacidade inibitória (IC50) de compostos puros conhecidos e método cromatográfico para validação do uso do biorreator na identificação de substâncias ativas em coleções combinatórias obtidas por síntese orgânica e/ou mistura de produtos naturais será desenvolvido.