Otimização de reação em cadeia da polimerase direta (PCRD) com sangue total: aplicação na detecção de Ehrlichia canis

• Processo: 10/15769-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Mozart de Azevedo Marins
• Beneficiário: Mariana Brum Lopes
• Instituição Sede: Universidade de Ribeirão Preto (UNAERP). Campus Ribeirão Preto. Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Erliquiose canina Ehrlichia canis Técnicas de diagnóstico molecular Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: blood | Diagnostic | Direct PCR | dog | Ehrlichia canis | Veterinary | Biologia Molecular

Resumo

A E. canis, agente etiológico da erliquiose monocítica canina (EMC), é uma das principais espécies de bactérias hemoparasitas a infectar cães. As técnicas de análise de DNA têm sido apontadas como uma ferramenta importante para auxiliar o diagnóstico da EMC, especialmente no estágio agudo da doença. Entretanto, o desenvolvimento de testes diagnósticos moleculares depende da facilidade de execução dos ensaios, custos, qualidade e facilidade de visualização dos resultados. Os objetivos deste projeto de IC integram um projeto maior que visa a otimização de ensaios de PCR convencional, PCR quantitativo e técnicas de amplificação isotérmica de DNA, como a LAMP, para a detecção de hemoparasitas em animais de criação e companhia. Dois pontos principais serão enfocados, a otimização das reações para utilização de sangue diretamente, sem a purificação prévia de DNA, e o desenvolvimento de uma formulação liofilizada para os reagentes utilizados nas reações. Neste projeto de IC serão realizados experimentos para estabelecer a formulação do tampão a ser utilizado em reações de PCR convencional e a avaliação da eficiência das reações para a detecção da bactéria E. canis. (AU)