Beta defensinas em membranas corioamnióticas de gestações complicadas por prematuridade: expressão gênica, protéica e imunolocalização

• Processo: 10/14724-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2011
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Márcia Guimarães da Silva
• Beneficiário: Nathalia Mayumi Noda Nicolau
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Âmnio beta-Defensinas Expressão gênica Expressão de proteínas Recém-nascido prematuro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Beta defensinas | Membranas corioamnióticas | prematuridade | Imunopatologia

Resumo

As membranas corioamnióticas são barreiras mecânicas contra a ascensão de microrganismos, possuem papel fundamental no sistema imune inato e foram descritas como tendo efeito inibitório sobre o crescimento de muitas bactérias, em parte, pela produção de beta defensinas. Objetivo: quantificar a expressão gênica e proteica e imunolocalização de beta defensinas (HBD-1, -2, -3 e -4) em membranas corioamnióticas de gestações complicadas por prematuridade. Material e Métodos: Serão incluídos no estudo, 30 fragmentos de membranas corioamnióticas de gestantes que apresentarem trabalho de parto pré-termo (TPP), na presença ou não de rotura prematura de membranas pré-termo (RPM-PT), que desencadearem parto pré-termo (PP). No momento da resolução da gestação, fragmentos de 1cm2 das membranas serão acondicionados em RNA later e submetidos à extração de RNA total. Após a extração do RNA, as amostras serão submetidas à obtenção de cDNA para posterior utilização na quantificação da expressão de ² defensinas (HBD1, 2, 3 e 4) pela técnica da PCR em tempo real empregando-se o sistema TaqMan® Gene Expression Assays. Outros fragmentos serão acondicionados a – 80ºC para pesquisa protéica pela técnica de Western Blot. Um terceiro fragmento será coletado em formalina, desidratados em álcool, diafanizados em xilol e a seguir incluídos em blocos de parafina. Os blocos obtidos serão seccionados para análise da imunolocalização das defensinas de interesse. A análise será realizada de acordo com os pressupostos estatísticos, considerando os resultados obtidos. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

NICOLAU, Nathalia Mayumi Noda. β Defensinas em membranas corioamnióticas de gestações complicadas por prematuridade: expressão gênica e imunolocalização. 2013. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina. Botucatu Botucatu.