Determinacao do perfil toxigenico em staphylococcus pela tecnica de rt-pcr.

• Processo: 06/01507-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2006
• Data de Término da vigência: 15 de março de 2007
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha
• Beneficiário: André Martins
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 05/02293-9 - Determinação do perfil toxigênico em Staphylococcus pela técnica de RT-PCR, AP.R
• Assunto(s): Bacteriologia Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR) Enterotoxinas Staphylococcus aureus Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Enterotoxinas | Pcr | Rt-Pcr | Staphylococcus Aureus | Tsst-1 | Bacteriologia

Resumo

Os membros do gênero Staphylococcus são os patógenos mais comuns encontrados no ambiente hospitalar, sendo agentes etiológicos de uma grande variedade de infecções. Vários fatores de virulência são responsáveis pelos sintomas e gravidade das infecções causadas por Staphylococcus aureus, encontrando-se entre eles as enterotoxinas estafilocócicas (EEs), que causam a intoxicação alimentar estafilocócica e a toxina 1 da Síndrome do Choque Tóxico (TSST-1). Alguns relatos indicam a produção de TSST-1 e de enterotoxinas estafilocócicas também por estafilococos coagulase-negativa (ECN). Diversos métodos imunológicos têm sido propostos para a detecção dessas enterotoxinas, porém, devido a sua baixa sensibilidade, ocorrência de reações inespecíficas ou reações cruzadas entre antígenos, esses métodos podem produzir resultados falso-negativos e falso-positivos. Foram então desenvolvidas técnicas de amplificação como a Polymerase Chain Reaction (PCR), que permite a detecção de genes responsáveis pela produção de EEs e TSST-1, com alta sensibilidade e especificidade. Contudo, esta técnica permite a detecção de genes contidos nas linhagens independentes de sua expressão, pois mesmo o gene estando presente no microrganismo, ele pode não estar ativo. O progresso dos métodos genotípicos oferece ainda a possibilidade de detectar a seqüência de RNAm responsável pela produção da enterotoxina alvo, utilizando a técnica de RT-PCR. A presença da seqüência de RNAm que codifica a síntese da toxina não deixa dúvidas quanto ao potencial tóxico do microrganismo. As divergênicas existentes quanto a enterotoxigenicidade dos ECN e a capacidade de causarem intoxicação alimentar ressaltam a necessidade de mais pesquisas utilizando técnicas confiáveis que comprovem a capacidade destes estafilococos de produzirem toxinas. Pelo exposto, o estudo tem como objetivo avaliar a capacidade de 80 amostras de S. aureus e 80 amostras de ECN isolados de diversos materiais clínicos, de produzir EEs e TSST-1, utilizando a técnica molecular RT-PCR.