Mecanismo de seleção de mutantes PHO-constitutivos em Escherichia coli

• Processo: 11/08577-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Beny Spira
• Beneficiário: Henrique Iglesias Neves
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Escherichia coli Mutação Regulon Fosfatos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Escherichia coli | Fosfato | Mutações | Pho | reccombinação | regulon | adaptação e evolução de bactérias

Resumo

O regulon PHO compreende um conjunto de genes que responde ao estímulo externo de limitação de fosfato (Pi). O operon pst (pstSCAB-phoU) pertence ao regulon PHO e codifica para um sistema de transporte de Pi de alta afinidade. Além disso, este sistema protéico também age como repressor dos genes de PHO em condições de abundância de Pi no meio. Neste projeto serão isolados mutantes espontâneos de pst em meio de cultura contendo glicerol-2-fosfato (G2P) como fonte única de carbono. A presença de G2P no meio exerce uma pressão seletiva para aliviar a repressão que o excesso de Pi exerce sobre o regulon PHO, resultando em mutações pst nulas. O mecanismo pelo qual a desrepressão de pst permite o crescimento das bactérias com G2P será investigado. Para este fim, serão construídos mutantes nulos em genes-chave através de recombinação alélica catalizada pelo sistema » Red. Em uma segunda parte do projeto, serão isolados mutantes pst espontâneos que perderam a função repressora sobre os genes do regulon PHO, mas que mantém ainda a capacidade de captar Pi. (AU)