Comparação de diferentes meios de cultivo celular para produção in vitro de embriões bovinos na ausência de soro fetal bovino

• Processo: 11/13463-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Fernanda da Cruz Landim
• Beneficiário: Henrique Pedro Dias
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Cultura de células Fertilização in vitro Embriogênese animal Técnicas in vitro Bovinos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Albumina Sérica Bovina | alfa-MEM | bovinos | Dmem | fertilização in vitro | F12 | Soro Fetal Bovino | Fertilização in vitro

Resumo

O meio de cultivo utilizado na produção in vitro de embriões afeta o desenvolvimento após fecundação, interferindo no metabolismo, na expressão de genes importantes para o desenvolvimento e na taxa de prenhez. Embriões bovinos são rotineiramente cultivados em meio suplementado com soro fetal bovino (SFB). O soro contém substâncias benéficas para o desenvolvimento embrionário como fatores de crescimento, substratos energéticos, aminoácidos, vitaminas, antioxidantes e quelantes de metais pesados. A presença do SFB facilita a eclosão do blastocisto e promove a compactação de mórulas. No entanto este composto possui um efeito bifásico no desenvolvimento embrionário, pois sua presença logo após a fertilização inibe as primeiras clivagens. Como agravante, o soro é considerado um composto variável e indefinido que interfere na repetibilidade dos resultados obtidos. A utilização do SFB tem sido associada, também, alterações metabólicas e acúmulo lipídico. A utilização de meios quimicamente definidos, sem a adição do SFB é uma alternativa para a produção in vitro de embriões bovinos visando à retirada de produtos de origem animal do meio de cultivo e o aumento da sobrevivência embrionária após a criopreservação. Desta forma o objetivo geral deste experimento é testar 3 meios diferentes de cultivo celular para produzir embriões bovinos in vitro em sistemas em ausência de SFB. Este estudo propõe o cultivo de embriões bovinos em meios alternativos e usados para cultivo de células tronco como o DMEM e o Alfa-MEM acrescidos com F12, meios estes não rotineiramente utilizados para a produção in vitro de embriões. Será feita uma comparação ao meio SOF, usualmente utilizado para cultivo embrionário. Ainda, analisaremos a taxa embrionária em meio com 10mg/ml de Albumina Sérica Bovina e na ausência de soro fetal bovino, concentração esta que se mostrou melhor em outro trabalho realizado pelo mesmo grupo de pesquisa.(AU)