Estudo da permanência de células-tronco pluripotentes em tecidos fetais e adultos

• Processo: 11/14689-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2012
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Irina Kerkis
• Beneficiário: Cristiane Valverde Wenceslau
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 10/51051-6 - Células-tronco adultas versus células tronco pluripotentes induzidas, AP.TEM
• Assunto(s): Células-tronco Pluripotência Encéfalo Células-tronco fetais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células-tronco fetais | encéfalo | nichos | pluripotência | Células-tronco

Resumo

Os clássicos os nichos de células-tronco embrionárias (CTE), são a mórula e ou a massa celular interna (MCI) do blastocisto. No entanto, trabalhos recentes sugerem que nichos de células-tronco pluripotentes (CTP) podem ser obtidos a partir de fases subseqüentes do desenvolvimento embrionário como por exemplo, de embriões pré-implantados, em particular, as do epiblasto de camundongo. Ainda, os tecidos fetais (TF) representam uma grande janela no desenvolvimento com características únicas que dependem de sua origem embrionária. As células-tronco (CT), isoladas de TF apresentam propriedades mais primitivas do que as homologas adultas, com alto potencial de expansão in vitro, expressão de marcadores de pluripotência e ausência de tumorogenicidade. Experiências recentes, nosso grupo de pesquisa isolou células com características morfológicas similares as CTP a partir do encéfalo, demonstrando assim a diversidade dos tipos celulares isolados dos TF. Com base nestes recentes achados objetivamos identificar as CTP similares as CTE no encéfalo de fetos de camundongo. Pretendemos também identificar CTP no encéfalo de animais jovens no intuito de demonstrar que organização hierárquica de CT esta sendo mantida durante a vida pós-natal. De acordo com nosso conhecimento não há trabalhos demonstrando a presença de CTP semelhantes às CTE nos TF em especial no encéfalo, assim como a identificação dos seus nichos no período fetal e pós-natal. Este estudo é inovador esbarrando na clássica definição das CT, em particular das CTP, o que irá contribuir com informações relevantes sobre a biologia do desenvolvimento, além da aposta no surgimento de uma nova fonte de CTP.Para o desenvolvimento do projeto serão utilizadas amostras de encéfalos de fetos e adultos camundongos, para o mapeamento dos nichos de CTP bem como para o isolamento de células similar as CTP. Após seu isolamento será realizado analise comparativa em função da pluripotência das células derivadas dos tecidos fetais e adultos. Analise da pluripotência será avaliado através da expressão de marcadores deCTP, CG a partir dos ensaios de imunocitofluorescência e PCR. A plasticidade das células isoladas também será realizada. E por último, serão realizados ensaios funcionais para confirmar a pluripotencialidade das células isoladas como formação de teratomas e formação de quimeras (Figura 2). Observação: CTE derivadas da linhagem USP1 estabelecidas pelo nosso grupo de pesquisa e MEFs derivadas do próprio feto serão utilizadas como controle em todos os experimentos.