Avaliação funcional de microRNAs no controle da expressão gênica de linhagens celulares de câncer de mama

• Processo: 11/23348-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Márcia Maria Chiquitelli Marques Silveira
• Beneficiário: Adriane Feijó Evangelista
• Instituição Sede: Hospital do Câncer de Barretos. Fundação Pio XII (FP). Barretos , SP, Brasil
• Assunto(s): Neoplasias mamárias Oncologia molecular Expressão gênica MicroRNAs
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de mama | expressão gênica | MicroRNAs | silenciamento de microRNA | Oncologia Molecular

Resumo

Com o advento das novas bases moleculares envolvidas na regulação pós-transcricional por microRNAs e o seu papel descrito nos processos de angiogênese, invasão, migração e metástase tumoral, surgem novas perspectivas no que diz respeito à predição de alvos para terapias futuras. Dentro desse contexto, o presente projeto segue a linha da genômica funcional aplicada à oncologia molecular com enfoque na biologia de sistemas, e refere-se ao estudo do papel dos microRNAs na modulação do perfil de expressão gênica em linhagens celulares de carcinoma mamário. Utilizaremos inicialmente a tecnologia de microarrays para traçar perfis de expressão gênica e de microRNAs de linhagens tumorais de mama. Além disso, programas de bioinformática serão aplicados à mensuração da expressão gênica e de microRNAs em larga escala (análise por agrupamento hierárquico, por significância estatística e construção de redes gênicas), pois concebemos que fenômenos complexos como angiogênese, migração e invasão celular só serão melhor entendidos por meio da genômica funcional em larga escala. A idéia central é traçarmos assinaturas de expressão diferencial das linhagens tumorigênicas e tentarmos estabelecer redes gênicas entre RNAm e miRNAs afim de selecionarmos microRNAs de interesse para o silenciamento in vitro e a avaliação do efeito moleculares e celulares dos mesmos. Para tal, determinadas ferramentas de bioinformática serão aplicadas visando (i) à predição de novas interações miRNA-RNAm, potencialmente envolvidas com o câncer, (ii) identificação dos perfis de expressão de RNAm antes e depois do silenciamento dos miRNAs selecionados; (iii) identificação das vias canônicas antes e depois do silenciamento dos miRNAs para avaliar os possíveis mecanismos alterados. Em adição, serão aplicados ensaios celulares para a avaliação das alterações celulares após o silenciamento dos microRNAs, tais como invasão, migração, viabilidade, citotoxidade e apoptose. Os resultados deste projeto serão úteis para o melhor entendimento das bases genético-moleculares e celulares do papel dos microRNAs no câncer de mama, juntamente com a identificação de potenciais alvos para terapia do câncer de mama.