Análise das mutações do gene Kras2 e sequenciamento de nova geração em regiões cromossômicas candidatas associadas com a suscetibilidade/resistência à resposta inflamatória

• Processo: 12/11345-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Pesquisa
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2012
• Data de Término da vigência: 21 de dezembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunogenética
• Pesquisador responsável: Andrea Borrego
• Beneficiário: Andrea Borrego
• Pesquisador Anfitrião: Tommaso Antonio Dragani
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Istituto Nazionale per lo Studio e la Cura dei Tumori, Itália
• Assunto(s): Mutação Resposta inflamatória Análise de sequência de DNA Oncogenes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Animais geneticamente selecionados | Locus Pas1 | mutação | oncogene Kras2 | Resposta inflamatória | sequenciamento | Mapeamento Genético

Resumo

Camundongos AIRmax (alta resposta) e AIRmin (baixa resposta) produzidos por seleção genética bidirecional com base na intensidade da resposta inflamatória aguda (AIR) divergem de maneira significativa para outros fenótipos tais como a suscetibilidade ao desenvolvimento de tumores. Os animais AIRmax são muito resistentes e os AIRmin são muito suscetíveis a protocolos de indução química de tumores na pele e nos pulmões, indicando que ocorre uma regulação genética comum compartilhada entre os fenótipos de reatividade inflamatória aguda e da predisposição à carcinogênese. Os animais AIRmax e AIRmin segregaram, respectivamente, os haplótipos de resistência e susceptibilidade no locus Pas1, principal fator genético de susceptibilidade à tumorigênse pulmonar no camundongo, o que pode ainda indicar o envolvimento desta região (que contém o oncogene Kras2), também na regulação da resposta inflamatória aguda. Nossa proposta consiste em identificar através da técnica de pirosequenciamento as mutações ativadoras do gene Kras2, bem como os níveis de expressão gênica das isoformas Kras4A e Kras4B por qPCR em tumores pulmonares de camundongos provenientes de população F2 (AIRmax x AIRmin), resultante do intercruzamento das duas linhagens. Os dados serão então usados como fenótipos em estudos de associação em larga escala (GWA para genome wide association) com marcadores de polimorfismo de sequência única SNPs para a identificação de elementos genéticos que regulem a mutabilidade e expressão do oncogene. (AU)