Expressão recombinante e caracterização de uma variante da enzima Sl-CathL de Sphenophorus levis, o bicudo da cana-de-açúcar

• Processo: 13/05982-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2013
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Flavio Henrique da Silva
• Beneficiário: Bruna Samhan Archangelo
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Inibidores enzimáticos Cana-de-açúcar Controle de pragas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bicudo da cana-de-açúcar | Cysteine peptidase | Recombinant expression | SPHENOPHORUS levis | Biologia Molecular

Resumo

A cana-de-açúcar é uma das culturas mais importantes para a economia brasileira, tanto para a produção do açúcar, quanto para a produção do etanol. O ataque de pragas ainda é um dos fatores que mais afetam a produtividade nos canaviais. A ocorrência do bicudo-da-cana (Sphenophorus levis), uma das principais pragas da cana-de-açúcar, tem aumentado significativamente no estado de São Paulo. Ainda não há um método de controle eficiente para esta praga, o que reforça a sua importância e a relevância de estudos de sua biologia. Em nosso laboratório foi realizado um estudo transcriptômico de larvas de S. levis, no qual diversas variantes da principal enzima digestiva Sl-CathL foram identificadas e agrupadas. Em algumas delas, o resíduo de cisteína do sítio ativo da enzima é substituído por uma serina, o que aparentemente implica na perda de função dessas variantes e pode estar relacionada com mecanismos de defesa do inseto. Este projeto tem como objetivo principal a produção da proteína recombinante alterada (Sl-CathL-CS) em Pichia pastoris para posterior caracterização do seu perfil enzimático. Estes estudos permitirão avaliar, in vitro, a capacidade da SI-CathL-CS em aumentar a atividade de outras variantes na presença de inibidores cistatínicos. Esperamos que esse estudo contribua para o entendimento do papel fisiológico dessa proteína e que possa ser aplicado para o estabelecimento futuro de variedades de cana-de-açúcar mais resistentes ao ataque deste inseto. (AU)