Treinamento em produção de anticorpos monoclonais por método de imunização subtrativa

• Processo: 13/09859-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2014
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: José Andrés Yunes
• Beneficiário: Ana Carolina de Souza Arruda
• Instituição Sede: Centro Infantil de Investigações Hematológicas Dr Domingos A Boldrini (CIB). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 12/12802-1 - Mutações cooperantes, caracterização funcional e anticorpos contra o mutante do IL7R na leucemia linfóide aguda, AP.R
• Assunto(s): Imunização Anticorpos monoclonais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anticorpo monoclonal | hIL-7R | Imunização subtrativa | Whole Cell ELISA | Oncologia

Resumo

Trabalhos realizados em nosso laboratório mostraram um novo mecanismo de leucemogênese, encontrado em 9% dos pacientes com leucemia linfoide aguda T (LLA-T), causado por mutações ativadoras da cadeia alfa do receptor da interleucina-7 (IL7R). Análises realizadas utilizando-se citometria de fluxo revelaram que esta oncoproteína é expressa na superfície das células LLA-T, tratando-se, portanto, de um marcador tumoral específico. Mais importante ainda, o hIL7R mutado é um alvo específico das células leucêmicas, não presente nas células hematopoiéticas normais e, por ser expresso na superfície dos blastos leucêmicos, poderá ser atingido com uso de anticorpos terapêuticos. Este projeto visa desenvolver anticorpos monoclonais contra o IL7R mutante, usando técnica de imunização subtrativa de camundongos. Células 3T3 serão transduzidas com o IL7R selvagem ou mutante. Camundongos Balb/c receberão inicialmente injeções ip de 3T3-IL7Rselvagem seguido de 3 doses de ciclofosfamida, de modo a depletar linfócitos B reativos. Após alguns ciclo de tolerização, os animais serão injetados com 3T3-IL7Rmutado e o título de anticorpos anti-IL7Rmutado versus IL7Rselvagem será acompanhado por Whole Cell ELISA. Quando atingido o platô, os animais serão sacrificados e os esplenócitos colhidos e usados para a produção de anticorpos monoclonais. (AU)