Estudo da correlação entre a frequência de células-tronco mesenquimais e a densidade de vasos sanguíneos em polpa dentária de humanos

• Processo: 13/10061-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2014
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia
• Pesquisador responsável: Marcelo Rocha Marques
• Beneficiário: Tatiane Bortolin Barbosa
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Células-tronco mesenquimais Polpa dentária Matriz extracelular Vasos sanguíneos Regressão Imuno-histoquímica Análise de variância
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células-tronco mesenquimais | Polpa dentária humana | Biologia pulpar

Resumo

Estudos tem demonstrado que a polpa de dentes humanos pode servir como fonte de células-tronco mesenquimais, de forma que após o isolamento, expansão e caracterização destas células, as mesmas poderiam ser utilizadas em terapias celulares. Sendo assim, é importante que sejam feitos mais avanços no entendimento da biologia destas células no que tange, por exemplo, a origem embriológica, localização espacial, potencial de diferenciação, a fim de melhor explorar a capacidade destas células em terapias. Tem sido reportado que células-tronco mesenquimais em alguns tecidos têm uma relação espacial com paredes de vasos sanguíneos. Tal localização parece ser importante nas funções que estas células exercem nos tecidos adultos, já que, por exemplo, estariam estrategicamente posicionadas em caso de lesões que gerem interrupção local da irrigação sanguínea. Neste sentido, o objetivo do presente projeto é verificar se existe uma correlação positiva entre a densidade vascular da polpa dentária humana com a frequência de CFU-F (unidades formadoras de colônias de fibroblastos) geradas a partir deste tecido, uma vez que um dos principais indicadores que caracterizam uma célula como sendo tronco mesenquimal é a sua capacidade proliferativa que pode ser avaliada por meio deste ensaio de formação de colônia. Para tanto, serão selecionados 10 pacientes de ambos os sexos, com idade entre 15 e 19 anos, e que tenham indicação profilática ou ortodôntica de remoção de dois terceiros molares pareados (2 superiores ou 2 inferiores hígidos) com dimensões mesio-distal, vestíbulo-lingual, ocluso-apical similares entre si (diferença d 10% para todas as medidas). A polpa dentária de um dos dentes será coletada e, após digestão da matriz extracelular, será realizado um ensaio para detectar a frequência de CFU-F, partindo de diferentes concentrações iniciais de células viáveis. A polpa do dente contralateral coletada do mesmo paciente será processada para realização de cortes histológicos de rotina. Três cortes obtidos de cada polpa serão marcados por meio de imunohistoquímica para CD34, um marcador específico para vasos sanguíneos, e após digitalização de imagens dos cortes, será realizada uma contagem da área de vasos da polpa analisada (densidade vascular). Os dados coletados serão tabulados e submetidos a testes estatísticos para detecção de distribuição normal e homogeneidade de variância, a fim de eleger o tipo de correlação e regressão que serão utilizadas para verificar a associação entre frequência de CFU-F e densidade de vasos sanguíneo da polpa dentária humana.