Medidas de H2O2 in vivo: caraterização do camundongo roGFP2-ORP1

• Processo: 13/22830-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 03 de maio de 2014
• Data de Término da vigência: 02 de maio de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Angelo Rafael Carpinelli
• Beneficiário: Leticia Prates Roma
• Supervisor: Tobias P. Dick
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Heidelberg University, Alemanha
• Vinculado à bolsa: 11/18993-0 - Identificação e localização da produção de radicais livres durante o processo secretório de insulina por nutrientes secretagogos: participação do complexo NADPH oxidase, BP.PD
• Assunto(s): Estresse oxidativo Espécies de oxigênio reativas Resistência à insulina Diabetes mellitus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: diabetes | in vivo measurements | islets | Reactive Oxygen Species | roGFP2-ORP1 | Fisiologia do Pancreas Endócrino

Resumo

Estresse oxidativo tem sido proposto como mecanismo comum no desenvolvimento da resistência à insulina, síndrome metabólica e diabetes. Embora estudos in vitro sugiram a participação das espécies reativas de oxigênio (EROs) no desenvolvimentos das patologias acima citadas, muito pouco é conhecido sobre as mudanças in vivo do estado redox nessas condições. Os biossensores redox geneticamente modificados oferecem um avanço nas metodologias até então disponíveis para investigação redox. As proteínas GFP fluorescentes (roGFPs) acopladas a enzimas redox permitem medidas especificas tanto do potencial redox da glutationa (utilizando a sonda GRX1-roGFP2) ou medidas na mudança da concentração de H2O2 (utilizando a sonda roGFP2-ORP1). Utilizando um modelo de resistência à insulina (dieta rica em gorduras), nós iremos analisar as mudanças redox em mitocôndrias e citossol de diferentes tecidos de animais transgênicos que expressam o sensor para H2O2, roGFP2-ORP1. Com essa técnica, nós esperamos elucidar quais células e tecidos são sensíveis às mudanças no estado redox durante o desenvolvimento da resistência à insulina. (AU)