Análise do papel de cofatores do exossomo na expressão e estabilidade da exoribonuclease RRP6 em Saccharomyces cerevisiae

• Processo: 14/04628-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2014
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Carla Columbano de Oliveira
• Beneficiário: Felipe Franco de Melo Bagatelli
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 10/51842-3 - SMOLBNET2: estudo de estrutura de proteínas componentes e reguladoras do exossomo de Archaea e de levedura, AP.TEM
• Assunto(s): Exossomos Saccharomyces cerevisiae Exorribonucleases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: exossomo | Nop53 | Nop8 | Rrp6 | Regulação pós-transcricional

Resumo

O exossomo é um complexo enzimático altamente conservado em eucariotos. Possui atividade exoribonucleolítica 3´-5´, desempenhando um papel fundamental no processamento e degradação de transcritos tanto no citoplasma como no núcleo. Em Saccharomyces cerevisiae possui duas subunidades catalíticas: Rrp44 e Rrp6. Mecanismos de regulação de sua atividade ainda não são totalmente conhecidos. Nop53 e Nop8 são duas proteínas nucleolares envolvidas na biossíntese da subunidade ribossômica 60S que apresentam efeitos antagônicos sobre a atividade do exossomo. Ensaios in vitro e in vivo demonstraram sua interação com Rrp6, sem, no entanto, detalhar suas implicações. Este projeto visa avaliar o efeito de Nop53 e Nop8 sobre os níveis de expressão e estabilidade da subunidade catalítica nuclear Rrp6 do exossomo de S. cerevisiae. Espera-se deste modo verificar se, interagindo com Rrp6 e afetando sua meia-vida, proteínas nucleolares modulem a atividade do exossomo. Para tanto, níveis de expressão de Rrp6 serão avaliados em cepas mutantes condicionais de Nop53 e Nop8. Os resultados obtidos contribuirão para melhor compreensão dos mecanismos fundamentais de regulação do exossomo eucariótico, bem como aprofundar a descrição funcional destas duas proteínas nucleolares que apresentam importante papel na biogênese de ribossomos.