Potencial participação da proteína Sonic Hedgehog na modulação nitrérgica estriatal: uma nova estratégia para a compreensão da etiologia da doença de Parkinson.

• Processo: 14/10667-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Elaine Aparecida Del Bel Belluz Guimarães
• Beneficiário: Terence Teixeira Duarte
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Neurofisiologia Degeneração neural Óxido nítrico Doença de Parkinson
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Doença de Parkinson | Estriado Dorsal | Neurodegeneração | Oxido Nitrico | Sonic Hedgehog | Substância negra parte compacta | Neurofisiologia

Resumo

Recentes estudos têm demonstrado que a neurotoxidade induzida pelo óxido nítrico (ON) e a deficiência de fatores tróficos estão envolvidos na cascata de eventos que leva a neurodegeneração observada na Doença de Parkinson (DP). A proteína Sonic Hedgehog (Shh) é um fator trófico com funções críticas durante o desenvolvimento embrionário, e embora existem poucas informações sobre suas funções no organismo adulto, recentemente foi demonstrado que a interrupção da sua sinalização, produzida pelos neurônios dopaminérgicos da substância negra parte compacta (SNc), provoca uma degeneração progressiva e déficits motores que lembram a DP. No estriado, uma subpopulação de neurônios nitrérgicos expressa a proteína de interação da família Hedgehog (Hip), antagonista natural da Shh, levantando a hipótese de uma relação funcional entre a sinalização Hedgehog e o ON. O objetivo deste projeto é avaliar o papel do sistema Hedgehog na modulação nitrérgica estriatal usando modelos experimentais in vivo da DP e in vitro. Iniciaremos esse estudo utilizando camundongos selvagens, nos quais induziremos a destruição dos neurônios da SNc, através do tratamento com a toxina 6-OHDA e analisaremos a expressão da Shh, Hip, e ON no estriado. Para as análises dos efeitos da perda da função e super-expressão da Shh, utilizaremos, respectivamente, camundongos nocautes obtidos com o método da enzima CRE recombinase e lesão bioquímica com AF64a, um inibidor da colina, cuja aplicação no núcleo pedúnculo pontino provoca uma super-regulação da expressão da Shh na SNc. Nestes animais serão aplicados testes motores e feitas medidas da Shh, Hip e ON no estriado. Utilizaremos cultura de células nitrérgicas estriatais de camundongos selvagens e nocautes para a Shh, Hip nas quais serão avaliados os efeitos das modulações da Shh e Hip sobre a produção de ON. Para a supressão da Hip, utilizaremos o método do RNA de interferência. Nossos estudos podem contribuir com informações importantes para o melhor conhecimento da fisiopatologia da DP e visa encontrar novos alvos moleculares e criar terapias para prevenir a neurodegeneração.