Uso de mutagênese sítio dirigida na compreensão da atividade do domínio catalítico da enzima SDH humana

• Processo: 14/27019-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2015
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Paulo Arruda
• Beneficiário: Lucas Vale Adjafre
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia computacional Mutagênese sítio-dirigida Sacaropina desidrogenases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aass | Degradação de Lisina | Epilepsia Dependente de Piridoxina | mutagenese sítio dirigia | Sacaropina | Sacaropina Desidrogenase | Mutagenese sitio dirigida

Resumo

A via da Sacaropina é a principal via de degradação de lisina em plantas e animais. O primeiro gene da via é o AASS, que codifica a enzima bifuncional Aminoadipato-Semialdeído Sintase, responsável pela conversão da Lisina em Aminoadipato Semialdeído (AASA) por meio do intermediário Sacaropina. Este é então oxidado ao Ácido Aminoadípico por meio da enzima Aminoadipato Semialdeído Desidrogenase (ALDH7A1). Um defeito nessa enzima causa a Epilepsia dependente de piridoxina (PDE) originada principalmente do acúmulo de AASA no organismo. Recentemente nosso grupo foi responsável por expressar, purificar e resolver a estrutura cristalográfica do domínio Sacaropina Desidrogenase (SDH) da enzima AASS humana. O conhecimento estrutural poderá ser usado para melhor compreensão do funcionamento bioquímico desta enzima. O presente projeto de Iniciação Científica visa, por meio de mutagênese sítio-dirigida, a substituição pontual por alanina de alguns aminoácidos escolhidos por análises de biologia computacional a fim de se entender melhor os sítios catalíticos e de ligação da enzima à sacaropina.