Avaliação in vitro de mutantes ihf de Salmonella Enteritidis em fagócitos aviários e em linhagem primária epitelial intestinal de origem aviária

• Processo: 15/12583-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 05 de outubro de 2015
• Data de Término da vigência: 04 de fevereiro de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
• Pesquisador responsável: Marcelo Brocchi
• Beneficiário: Jacqueline Boldrin de Paiva
• Supervisor: Bernd Kaspers
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Ludwig Maximilian University of Munich (LMU Munich), Alemanha
• Vinculado à bolsa: 13/26073-4 - Avaliação da Atenuação e Potencial Vacinal de Mutantes Naps de Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium, BP.PD
• Assunto(s): Salmonella enteritidis Microbiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ihf mutant strains | intestinal cells | phagocytic cells | poultry | salmonella enteritidis | Microbiologia

Resumo

Dados recentes do nosso grupo demonstrou que mutantes nulos de Salmonella enterica para genes que codificam para Naps (nucleoid-associated proteins) foram atenuados quanto a virulência e capazes de induzir proteção no modelo murino, em diferentes níveis. Estes resultados sugerem uma importante função das Naps na virulência bacteriana. Durante a execução de nosso projeto de Pos-doutorado (Fapesp 2013/26073-4) estudamos o papel biológico da Nap IHF (integration host factor) para Salmonella Enteritidis (SE) durante a infecção das aves. Nossa intenção inicial foi avaliar o potencial dos mutantes simples de SE ”ihfA e ”ihfB, e do mutante duplo de SE ”ihfA”ihfB em atuar como cepa vacinal viva para prevenção da infecção por SE em aves comerciais, tendo em vista a superioridade das vacinas vivas em comparação às bacterinas.Apenas a linhagem SE”ihfA atendeu aos requisitos necessários para ser considerada uma linhagem atenuada e assim sendo, testes de avaliação do potencial vacinal desta linhagem estão sendo conduzidos. Nós verificamos ainda, uma interessante regulação a qual os genes ihf de SE parecem participar. De acordo com nossas observações, a deleção de ihfA e ihfB prejudicou a capacidade da SE de causar infecção sistêmica, provavelmente por algum efeito da deleção na capacidade da bactéria acessar o sistema retículo endotelial ou de sobreviver no interior de fagócitos. Por outro lado, na ausência de ihfB ou de ambos: ihfA e ihfB verificou-se um aumento na habilidade destas linhagens de colonizar o ceco das aves. Dessa forma, nós acreditamos que ihf poderia estar regulando de forma diferente genes responsáveis por colonização intestinal e infecção sistêmica. Este projeto tem por intuito estudar in vitro a infecção de fagócitos e de linhagens primarias epiteliais intestinais de aves, na tentativa de corroborar nossas observações in vivo bem como de aumentar as informações acerca dos mecanismos responsáveis pela colonização intestinal e disseminação sistêmica de SE.