Estudos das propriedades físico-químicas e mecânicas da membrana eritrocitária de indivíduos normais e com esferocitose hereditária

• Processo: 15/09948-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2015
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Karin Do Amaral Riske
• Beneficiário: Bruna Renata Casadei Buzolin
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Esferocitose hereditária Biomembranas Fluorescência Microscopia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Eritrócito | esferocitose hereditária | fluorescência | membrana | microscopia | Separação de fases | Biomembranas

Resumo

A membrana eritrocitária é um ótimo modelo para o estudo de membranas biológicas devido a sua facilidade de obtenção, isolamento e possibilidade de monitoramento da desestabilização (hemólise) de sua estrutura. Apesar da sua composição e função serem bastante conhecidas, ainda há poucos relatos na literatura sobre a relação entre a organização de seus componentes, a estabilidade de sua estrutura e função. Defeitos na membrana eritrocitária incluem a esferocitose hereditária (EH), uma anemia hemolítica congênita causada pela deficiência de proteínas do citoesqueleto (±- ou ²- espectrina, anquirina ou proteína 4.2) ou integral (banda 3). A deficiência dessas proteínas desestabiliza a bicamada lipídica e, como consequência, os eritrócitos assumem uma forma esférica e com menor área de superfície, o que prejudica o tráfego na microcirculação, favorecendo o aumento do estresse oxidativo e hemólise. Para compreender o complexo comportamento das proteínas e lipídios nas membranas e o envolvimento destes na estabilidade e organização de sua estrutura, utilizaremos vesículas unilamelares gigantes (GUVs) e vesículas lipossomais compostas de membranas eritrocitárias de indivíduos normais e com EH, extratos lipídicos de membrana eritrocitária e composições lipídicas biomiméticas para obter informações sobre as propriedades físico-químicas e mecânicas das membranas. Além disso, o efeito protetor de agentes antioxidantes (±-tocoferol e ácido p-coumárico) e a solubilização por detergentes serão investigadas. Para isso, utilizaremos as técnicas biofísicas de microscopia ótica por contraste de fase e fluorescência, eletrodeformação e eletroporação, espalhamento de luz (DLS), rastreamento das vesículas (NTA) e ressonância paramagnética eletrônica (RPE).

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CASADEI, BRUNA R.; DIMOVA, RUMIANA; RISKE, KARIN A.. Bending Modulus and Edge Tension of Giant Unilamellar Vesicles (GUVS) Composed of Lipid Extracts from Erythrocytes Membranes. BIOPHYSICAL JOURNAL, v. 114, n. 3, p. 1-pg., 2018-02-02. (15/09948-2)

COUTO, V. M.; CASADEI, B. R.; RODRIGUES DA SILVA, G. H.; RISKE, K. A.; OLIVEIRA-NASCIMENTO, L.; DE PAULA, E.. Capsaicin and local anesthetics interaction with model membranes. EUROPEAN BIOPHYSICS JOURNAL WITH BIOPHYSICS LETTERS, v. 46, p. 1-pg., 2017-07-01. (15/09948-2, 14/14457-5, 15/11804-9)