Expressão heteróloga da proteína Hfq e obtenção da linhagem FLAG-Hfq com expressão induzida

• Processo: 15/21025-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Marilis Do Valle Marques
• Beneficiário: Nadine Gimenez de Assis
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/04046-8 - Sistemas regulatórios da resposta bacteriana a estresses, AP.TEM
• Assunto(s): Regulação da expressão gênica Caulobacter Escherichia coli Microbiologia Biologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Caulobacter | expressão heteróloga | Hfq | Regulação gênica | regulação gênica

Resumo

O projeto propõe a obtenção de uma linhagem de E. coli que expresse a proteína Hfq de Caulobacter fusionada a um epitopo FLAG, bem como a obtenção de uma linhagem de Caulobacter mutante condicional para o gene hfq. As metodologias utilizadas serão a amplificação por PCR e clonagem em vetores plasmidiais adequados, indução da proteína e sua purificação em cromatografia em resina de níquel, além de procedimentos de transformação bacteriana e outras técnicas de Microbiologia e Biologia Molecular.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ASSIS, NADINE G.; RIBEIRO, RODOLFO A.; DA SILVA, LARISSA G.; VICENTE, ALEXANDRE M.; HUG, ISABELLE; MARQUES, MARILIS V.. Identification of Hfq-binding RNAs in Caulobacter crescentus. RNA BIOLOGY, v. 16, n. 6, MAR 2019. (16/06378-3, 14/13552-4, 14/04046-8, 15/21025-7)