Transformação de Arabidopsis thaliana com genes CBF e sua caracterização contra estresses

• Processo: 16/09867-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia
• Pesquisador responsável: Paulo Mazzafera
• Beneficiário: Giovanna Stolf de Barros
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/23541-0 - Identificação de fatores de transcrição CBF em eucalipto e verificação de sua potencialidade contra estresses abióticos, AP.R
• Assunto(s): Eucalipto Fisiologia vegetal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Eucalipto | tolerância ao frio | Fisiologia Vegetal

Resumo

A indução de muitos genes em resposta ao frio pela via ABA-independente inclui uma família de fatores de transcrição, os CBFs ("C - repeat-binding factors"), também conhecidos como DREB1 ("dehydration-responsive element-binding protein 1") (Benedict et al., 2006; Navarro et al., 2011). Membros desta família gênica, identificados pela primeira vez em A. thaliana, são caracterizados por controlar a transcrição de uma variedade de genes com funções importantes durante a aclimatação ao frio e no desenvolvimento de tolerância ao congelamento. No projeto de pesquisa ora enviado é prevista a transformação de plantas de Arabidopsis thaliana usando mutantes deficientes para os genes CBF. O isolamento desses genes se dará inicialmente monitorando várias espécies de eucalipto, ao todo 19, em relação às suas respostas ao frio. Plantas tolerantes devem apresentar menor dano oxidativo, o que pode ser determinado indiretamente seguindo-se a fluorescencia do fotossistema II. Tais plantas com maior tolerância terão então genes CBFs isolados usando primers conservados e o kit GenomeWalker. Em seguida, estes genes serão introduzidos em vetores do sistema Gateway, clonados em E. coli. Todo este procedimento está descrito em detalhe no projeto. Cada bactéria transformada portanto o vetor para um gene isolado será usada para transformar mutantes de A. thaliana deficientes no gene homólogo isolado de eucalipto. As atividades do bolsista se inserem na transformação das plantas e depois na caracterização da provável tolerância adquirida a estresses pela inserção do gene CBF de eucalipto.