Caracterização da função da proteína regulatória TIPRL na biogenese das fosfatases 2A em células normais e cancerígenas

• Processo: 16/12560-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2016
• Data de Término da vigência: 26 de janeiro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Juliana Helena Costa Smetana
• Beneficiário: Ana Amélia Sanchez Iacia
• Instituição Sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 18/09337-1 - Investigação da função da TIPRL em modelos celulares da biogênese da PP2A, BE.EP.DR
• Assunto(s): Serina Transdução de sinais Neoplasias
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | Pp2A | serina | Supressor Tumoral | Tiprl | treonina fosfatases | Sinalização celular

Resumo

A proteína PP2A é uma fosfatase do tipo Serina/Treonina com múltiplas funções na fisiologia e sinalização celular, atuando principalmente na apoptose, no controle do ciclo celular e como supressor tumoral. PP2A é um heterotrímero formado por uma subunidade catalítica (C), uma subunidade de ancoragem (A) e uma subunidade regulatória variável (B). A subunidade B pode pertencer a diferentes famílias (B, B', B'' e B''') e cada uma destas determina a especificidade do substrato e a localização subcelular da fosfatase. Sabe-se que as proteínas reguladoras PME-1, LCMT-1, ±4, TIPRL e PTPA estão envolvidas no processo de biogênese da fosfatase. Esse processo consiste em uma série de etapas envolvendo o reconhecimento de uma sequência conservada no C- terminal da subunidade catalítica e a modificação sequencial do sítio catalítico até atingir sua conformação ativa. Entretanto, ainda faltam informações sobre como e quando cada uma dessas proteínas atua neste processo, especialmente no caso de TIPRL. TIPRL tem um papel positivo do desenvolvimento de câncer hepático, e possivelmente em outros tipos de câncer. Recentemente, nosso grupo resolveu a estrutura tridimensional da proteína TIPRL humana e demonstrou que esta proteína se liga especificamente na sequência conservada presente no C-terminal dessas fosfatases, o que sugere fortemente um papel no processo de biogênese. Portanto, este projeto tem como objetivo estudar a biogênese da fosfatase PP2A elucidando o papel de cada uma das proteínas regulatórias, principalmente a TIPRL, na montagem e atividade do heterotrímero em células normais e tumorais. Para o desenvolvimento do projeto serão usadas técnicas de mutagênese sítio-dirigida e os mutantes gerados serão expressos em cultura de células humanas e suas interações e atividade serão determinadas. A localização subcelular das proteínas regulatórias e dos mutantes será determinada em microscópio confocal. Também serão analisados o perfil de interações e a atividade enzimática de PP2A mediante a superexpressão e silenciamento da TIPRL e ±4, assim como sob condições de estresse nutricional. Resultados preliminares deste projeto indicam que TIPRL pode regular a montagem das holoenzimas de PP2A e sua atividade.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

IACIA, Ana Amélia Sanchez. Caracterização da interação da proteína TIPRL com fosfatases tipo 2A em cultura de células. 2021. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.