Análise da modulação de expressão de uma aminoacil tRNA-proteina transferase putativa de Leishmania major sob diferentes condições de estresse

• Processo: 17/01713-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Angela Kaysel Cruz
• Beneficiário: Angela Poletto
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/50219-9 - Investigação sobre fatores e mecanismos do controle de expressão gênica em Leishmania: do papel de modificações pós-traducionais, RNAs não codificadores, cis-elementos e amplificação gênica, AP.TEM
• Assunto(s): Leishmania major Estresse oxidativo Estresse térmico Estresse do retículo endoplasmático Inibidores da síntese de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aminoacil-tRNA-proteína transferase | estresse | Leishmania major | N-end-rule pathway | Biologia Molecular de Leishmania sp

Resumo

O parasito Leishmania é exposto a diferentes ambientes hostis e a adaptação a estímulos estressores, portanto, faz parte de seu ciclo de vida. Grande parte dos mecanismos adaptativos desse parasito consiste em modular o perfil de expressão gênica. Essa regulação é majoritariamente executada por processos pós-transcricionais e pós-traducionais. Dentre os processos de regulação pós-traducional há uma via de proteólise dirigida conhecida como via "N-end rule", que promove a adição de um aminoácido ao N terminal de diversas proteínas, marcando-as para serem poliubiquitinadas e degradadas pelo proteassomo. Ainda que considerado um processo universal de sinalização, esta via não está descrita em Leishmania. Em estudos conduzidos em nosso laboratório a proteína codificada pelo gene LmjF.21.0725 foi caracterizada como uma provável aminoacil-tRNA-proteína transferase, a enzima que catalisa a transferência do aminoácido ao resíduo N-terminal. Resultados preliminares sugerem que ela seja modulada após submissão de promastigotas de Leishmania major a estresse oxidativo. Em outros organismos, tanto procariotos como em eucariotos, essa via é ativada por diversos estímulos estressores. Buscando compreender a atuação dessa proteína em Leishmania major, este projeto tem como objetivo investigar a modulação dos níveis do transcrito e da proteína aminoacil-tRNA proteína transferase putativa em diferentes situações de estresse; oxidativo (H2O2) e térmico, estresses de retículo endoplasmático (Tunicamicina) e por inibição de síntese proteica (G418). (AU)