Obtenção e caracterização bioquímica da metacaspase (CaMCA) de Candida Albicans

• Processo: 17/23543-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Acordo de Cooperação: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
• Pesquisador responsável: Mauricio Ferreira Marcondes Machado
• Beneficiário: Taíz dos Reis Santos
• Instituição Sede: Pró-Reitoria Acadêmica. Universidade de Mogi das Cruzes (UMC). Campus da Sede Mogi das Cruzes. Mogi das Cruzes , SP, Brasil
• Assunto(s): Clonagem Cinética Cinética enzimática
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cinética | clonagem | expressão | purificação | substrato | Cinética enzimática

Resumo

O ciclo de vida é determinado basicamente pelos processos de divisão, diferenciação e morte. Nos últimos anos, estudos mostraram o envolvimento de uma família de proteases envolvidas na morte celular programada em mamíferos, em organismos eucarióticos simples como fungos e protozoários (metacaspases), em metazoários, bem como no ameboide Dictyostelium sp (paracaspases) melhorar, entretanto, poucos são os estudos sobre a funcionalidade bioquímica dessas proteases. No presente projeto pretendemos realizar o estudo bioquímico para a determinação dos parâmetros cinéticos (KM, kcat e kcat/KM) da metacaspase de Candida albicans (CaMCA), com isto estudar a especificidade, avaliar qual o efeito de sais, pH e temperatura na atividade proteolítica destas proteases. Recentemente foi descrito a importância do cálcio no funcionamento destas proteases, pretendemos também realizar ensaios cinéticos com a CaMCA variando a concentração deste íon e averiguar qual a importância do mesmo na relação estrutura-atividade desta protease, avaliando o efeito do cálcio nos parâmetros físico-químicos da CaMCA. (AU)