Cultivo e multiplicação de células-tronco espermatogoniais em membranas corioalantôides de embriões de galinha

• Processo: 17/24534-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2018
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Ricardo Jose Garcia Pereira
• Beneficiário: Brian Matayoshi Kanashiro
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Cultura de células Células-tronco espermatogoniais Membrana corioalantoide Diferenciação celular Incubação Técnicas de reprodução assistida Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células-tronco germinativas | conservação de germoplasma | Cultivo celular | reprodução assistida | transplantes germinativos | Reprodução de aves

Resumo

As células-tronco espermatogoniais (SSCs, do inglês spermatogonial stem cells) são as únicas células masculinas capazes de transmitir a informação genética ao longo de várias gerações. Esta característica se deve ao potencial de auto-renovação e diferenciação celular, capaz de originar milhões de espermatozoides. Dessa maneira, o uso das SSCs tem gerado metodologias promissoras na preservação de recursos genéticos animais, por meio de transplante intra e interespecíficos. Todavia, o uso de tais metodologias ainda é limitado devido aos problemas inerentes a manutenção e multiplicação das SSCs in vitro e os custos atrelados ao seu cultivo em laboratório. Assim, o presente projeto propõe avaliar a eficiência do cultivo interespecífico de SSCs em membranas corialantôides de embriões de galinha, visando um método alternativo e de baixo custo para o cultivo destas células. Para tal, testículos de codornas serão dissociados e uma suspensão de células-tronco espermatogoniais será diluída e injetada (aproximadamente 1 x 106 células/50µl) sobre a membrana corioalantôide do embrião de galinha. As taxas de crescimento, viabilidade e diferenciação celular serão avaliadas a cada 48 horas perfazendo um total de 192 horas (8 dias de incubação após a inoculação). Esperamos com esse experimento elaborar um protocolo prático de cultivo in ovo de SSCs capaz de manter as células viáveis e indiferenciadas a um baixo custo laboratorial.