Expressão e purificação do domínio RT (transcriptase reversa) da telomerase de Leishmania major com visas a ensaios de interação

• Processo: 18/03095-6
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de agosto de 2018
• Vigência (Término): 31 de dezembro de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Isabel Nogueira Cano
• Beneficiário: Vitor Luiz da Silva
• Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Leishmania Leishmania major Proteínas recombinantes Proliferação celular Telomerase Telômero Técnicas in vitro

Resumo

A leishmaniose é uma doença causada por parasitos da família Trypanosomatidae do gênero Leishmania, considerada doença negligenciada, para a qual não há programas adequados de controle ou combate à doença. Os tratamentos existentes no mercado farmacêutico apresentam alta toxicidade, custo e levam ao aparecimento de parasitos resistentes. A ausência de tratamentos adequados torna importante a pesquisa em busca de novos alvos terapêuticos contra Leishmania. Recentemente, os telômeros têm sido considerados bons alvos de estudos terapêuticos, dado seu papel na manutenção da estabilidade genômica e da proliferação celular. Por sua vez, os telômeros são mantidos pela ação do complexo ribonucleoproteico denominado telomerase que possui dois componentes principais, a transcriptase reversa (TERT) que é o componente proteico e o componente RNA (TER), um RNA longo não codificador que contém o molde para adição das repetições teloméricas nas extremidades dos cromossomos. O componente TERT possui domínios estruturais que têm funções diferentes. Neste trabalho damos início aos estudos com o domínio RT da TERT de Leishmania major, o qual foi clonado num vetor de expressão bacteriano. Resultados preliminares mostram que o domínio é expresso na fração insolúvel do extrato bacteriano. Portanto, este trabalho tem como objetivo obter um protocolo eficiente da purificação e renovelamento do domínio RT da telomerase de L. major, para futuros ensaios in vitro de interação proteína-ácidos nucléicos.