Engenharia tecidual aplicada para regeneração do complexo dentino-pulpar: avaliação de um scaffold de quitosana-cálcio em modelo de exposição pulpar simulada in vitro

• Processo: 18/09378-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Materiais Odontológicos
• Pesquisador responsável: Diana Gabriela Soares dos Passos
• Beneficiário: Isabela Sanches Pompeo da Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 16/15674-5 - Associação de técnicas de engenharia tecidual para modulação da regeneração de tecidos mineralizados sob inflamação degenerativa: análise em modelos de cultura-3D em biorreator de perfusão e inflamatórios em animais, AP.JP
• Assunto(s): Engenharia tecidual Biomateriais Células-tronco Tecidos suporte Quitosana Quimiotaxia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biomateriais | Células tronco | Engenharia tecidual | Engenharia Tecidual

Resumo

O emprego da engenharia tecidual para regenerar tecidos via modulação das células precursoras locais tem ganhado destaque nas áreas médica e odontológica, com o objetivo de desenvolver terapias biológicas efetivas. Dentro deste contexto, o presente deste estudo visa avaliar o potencial de um scaffold experimental de quitosana em modular a quimiotaxia e diferenciação odontogênica de células tronco pulpares (DPSCs), empregando-se um modelo de estudo alternativo que simula uma exposição pulpar em laboratório. Para isto, uma solução a 2% de quitosana será formulada e a esta será adicionada uma suspensão rica em cálcio a 1%, seguida da distribuição em moldes de teflon para serem submetidos ao processo de separação de fases em baixas temperaturas, obtendo-se, desta forma, scaffolds porosos. Uma cultura tridimensional das DPSCs será estabelecida sob discos de dentina adaptados em câmara pulpar artificial com pressão de 20 cm.H2O, simulando a condição de exposição pulpar in vitro. Os scaffolds serão posicionados em perfurações nos discos de dentina, em intimo contato com a cultura 3D, sendo os conjuntos incubados por 14 dias. A superfície dos scaffolds será submetida a análise de viabilidade celular (ensaio de live/dead) e expressão de sialoproteína dentinária (DSP) por imunofluorescência, para avaliar a migração de células viáveis com fenótipo odontoblástico para sua superfície. A células da cultura 3D serão avaliadas quanto à sua viabilidade (ensaio de live/dead) e expressão gênica de DSPP (PCR tempo real). Os dados serão analisados estatisticamente e qualitativamente.