| Processo: | 18/18258-8 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de janeiro de 2019 |
| Data de Término da vigência: | 31 de outubro de 2019 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular |
| Pesquisador responsável: | Iracilda Zeppone Carlos |
| Beneficiário: | Thais de Cassia Negrini |
| Supervisor: | Hyun Koo |
| Instituição Sede: | Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil |
| Instituição Anfitriã: | University of Pennsylvania, Estados Unidos |
| Vinculado à bolsa: | 17/13334-5 - Resposta imune induzida por biofilmes mono, dual e multiespecies formados por Sporothrix schenckii e/ou Staphylococcus spp., BP.PD |
| Assunto(s): | Biofilmes |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Bacterial | Biofilm | cross-kingdom | fungal | interaction | mannan | Imunologia |
Resumo Tem sido sugerido que os biofilmes de espécies mistas de fungo-bactéria podem ser mais virulentos como resultado da interação entre esses diferentes reinos de microrganismos mediada por mananas presentes na parede celular dos fungos. Nosso objetivo é avaliar o papel da beta-mananase no desenvolvimento de biofilme de espécies mistas através da ruptura da interação bacteriana-fúngica mediada por manana. Especificamente, este estudo tem como objetivo determinar os efeitos da beta-mananase nas forças de ligação bacteriana-fúngica e na estrutura 3D e na estabilidade mecânica dos biofilmes. Um modelo de biofilme bem caracterizado e validado baseado no co-cultivo de C. albicans e S. mutans será usado para melhor padronizar as condições experimentais para a atividade da mananase (Estudo 1). Em seguida, a mananase será testada contra S. schenckii e Staphylococcus usando o modelo acima mencionado e condições experimentais previamente padronizadas (Estudo 2). C. albicans e S. schenckii serão expostos a beta-mananase e após 60 minutos a viabilidade celular será avaliada por Fluorescência Confocal Time-Lapse, a morfologia celular será avaliada por Microscopia Eletrônica de Varredura e manana presente na parede celular fúngica após exposição à beta-mananase será quantificada. Adicionalmente, o efeito da beta-mananase sobre as forças de ligação entre C. albicans e S. mutans e entre S. schenckii e Staphylococcus aureus ou Staphylococcus epidermidis será avaliado por Microscopia de Força Atômica. Além disso, biofilmes mono-espécies ou multi-espécies de S. mutans / C. albicans e biofilmes mono-espécies ou multi-espécies de S. schenckii / S. aureus ou S. epidermidis serão cultivados por até 72 horas e expostos a beta-mananase duas vezes ao dia. Os biofilmes serão avaliados através de Microscopia de Varredura a Laser Confocal para determinar sua estrutura 3D, assim como o número de microcolônias e o tamanho das microcolônias. Além disso, o efeito da beta-mananase na coesão e estabilidade mecânica dos biofilmes será avaliado por um Testador de Força Mecânica de Biofilme Induzido por Cisalhamento sob tensão de cisalhamento constante. Espera-se que a virulência e o desenvolvimento de biofilmes de espécies mistas fúngicas-bacterianas seja controlada pelo rompimento de interações mediadas por manana. | |
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