Efeitos do sobrenadante de explantes placentários tratados com vitamina D no estresse oxidativo, inflamação e disponibilidade de óxido nítrico em células endoteliais

• Processo: 19/00234-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 06 de maio de 2019
• Data de Término da vigência: 05 de agosto de 2019
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Maria Terezinha Serrão Peraçoli
• Beneficiário: Priscila Rezeck Nunes
• Supervisor: Mattias Carlstrom
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Karolinska Institutet, Suécia
• Vinculado à bolsa: 16/23452-2 - Efeito imunomodulador da vitamina D sobre a ativação de inflamassomas em tecido placentário de gestantes portadoras de pré-eclâmpsia, BP.DR
• Assunto(s): Estresse oxidativo Óxido nítrico Inflamação Pré-eclâmpsia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: inflammation | nitric oxide | Oxidative stress | Placental Explants | preeclampsia | Vitamin D | Imunologia da relação materno-fetal

Resumo

A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome exclusiva da gestação humana que apresenta inicialmente disfunção placentária local e evolui para uma doença identificada por hipertensão e / ou proteinúria. O óxido nítrico (NO) é um mediador biológico com papel importante durante a gestação, representando o principal vasodilatador na placenta. Distúrbios no sistema NO são responsáveis pela disfunção endotelial vascular presente na PE e juntamente com a produção em excesso de espécies reativas de oxigênio (EROs), pode explicar a má perfusão placentária na PE. O objetivo deste estudo é avaliar se as células endoteliais humanas (HUVEC) cultivadas com sobrenadante de explantes placentários de grávidas normotensas (NT) e pré-eclâmpticas com vitamina D apresentam diminuição do estresse oxidativo e aumento da biodisponibilidade do NO. A linhagem de células endoteliais será cultivada até atingir 80% de confluênciae depois incubada por 4 e 24 horas em meio com 20% (v / v) de sobrenadante de explantes placentários cultivados com ou sem peróxido de hidrogênio (H2O2) e vitamina D (VD).As células e o sobrenadante serão utilizados para realizar os ensaios. Ressonância paramagnética eletrônica (EPR) e sistema de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) serão usados para avaliar o NO e seus metabólitos oxidados, nitrato e nitrito, mas também EROs específicas. A determinação de TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico) será empregada para avaliar a peroxidação lipídica mediada por EROs, assim como dimetilarginina assimétrica (ADMA). Citocinas incluindo IL-1², IL-18, TNF-±, IL-10 e caspase-1 serão avaliadas pelo ensaio ELISA Multiplex. A análise estatística (ANOVA ou teste t) será realizada empregando testes paramétricos ou não paramétricos, com valor de p <0,05 considerado significativo.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

NUNES, P. R.; GOMES, V. J.; SANDRIM, V. C.; PERACOLI, J. C.; PERACOLI, M. T. S.; CARLSTROM, M.. Effects of vitamin D-induced supernatant of placental explants from preeclamptic women on oxidative stress and nitric oxide bioavailability in human umbilical vein endothelial cells. Brazilian Journal of Medical and Biological Research, v. 54, n. 8, 2021. (16/23452-2, 19/00234-8)