Clonagem, expressão e purificação da paracaspase Dictyostelium discoideum

• Processo: 19/01948-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Mauricio Ferreira Marcondes Machado
• Beneficiário: Mariana Nascimento Romero Trujilho
• Instituição Sede: Pró-Reitoria Acadêmica. Universidade de Mogi das Cruzes (UMC). Campus da Sede Mogi das Cruzes. Mogi das Cruzes , SP, Brasil
• Assunto(s): Clonagem Purificação de proteínas Proteínas recombinantes Ciclo celular Dictyostelium Transporte proteico Desenvolvimento de fármacos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: clonagem | expressão | Paracaspase | purificação | Proteína Recombinante

Resumo

O ciclo celular é determinado basicamente pelos processos de divisão, diferenciação e morte, em organismos como os mamíferos é descrito que a morte celular está ligada a ação de enzimas conhecidas como caspases. Nos últimos anos foram descritas enzimas da família das caspases que estão envolvidas na morte celular programada em organismos eucarióticos simples como fungos e protozoários (metacaspases) e em metazoários e no amebóide Dictyostelium sp (paracaspases). O estudo bioquímico das metacaspases e paracaspases pode auxiliar na compreensão sobre a morte celular programada em organismos unicelulares como fungos e protozoários além de serem possíveis alvos para inibidores e/ou ativadores para desenvolvimento de fármacos para doenças negligenciadas como a doença de Chagas, Leishmaniose, entre outras. O modelo celular do Dictyostelium discoideum é evolucionariamente mais próximo de animais e fungos do que as plantas e diversos sinais de transdução são conservados entre o Dictyostelium e mamíferos. Dictyostelium tem um ciclo de vida diferenciado, que consiste em uma fase unicelular e outra multicelular. Dictyostelium é um modelo único de estudo das diferenças e semelhanças na regulação da morte celular programada e do controle do ciclo celular em organismos uni-e multicelulares. O presente projeto de pesquisa tem como finalidade a obtenção da paracaspase de Dictyostelium discoideum recombinante que será utilizado para a realização da caracterização bioquímica desta protease.