Clonagem, expressão, estudo bioquímico da CGTase recombinante produzida por Bacillus clausii E16 e caracterização das ciclodextrinas produzidas

• Processo: 06/00748-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2007
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Ciência e Tecnologia de Alimentos
• Pesquisador responsável: Roberto da Silva
• Beneficiário: Heloiza Ferreira Alves do Prado
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Caracteristicas Bioquimicas | Cgtase | Clonagem | Expressao | Producao | Purificacao | Microbiologia Aplicada

Resumo

Este projeto é uma proposta de trabalho para o programa de pós-doutorado da FAPESP a ser desenvolvido junto à Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, no Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exata (IBILCE), no Departamento de Química e Ciências Ambientais. Tal proposta configura-se como uma continuação do trabalho sobre seleção, produção, purificação e caracterização da enzima ciclodextrina glucanotransferase (CGTase) microbiana, realizado durante os períodos de Mestrado e Doutorado. Durante o Doutorado, realizado junto ao Instituto de Biociências do campus de Rio Claro IB/UNESP, alcançou-se a purificação e caracterização de duas CGTase microbianas. Dando continuidade a esses estudos propõe-se em uma primeira etapa a clonagem, expressão e sequenciamento do gene para CGTase, bem como a produção, purificação e caracterização da CGTase recombinante. Em uma segunda etapa, pretende se estudar a estrutura tridimensional da proteína com base na homologia estrutural da mesma, além de proceder ensaios de mutação sítio dirigida e mutação por PCR induzido a erro visando melhorar algumas características de interesse industrial para aplicação industrial e em uma terceira etapa produzir e caracterizar os tipos de ciclodextrinas produzidas pela CGTase recombinante. (AU)