Avaliação do efeito anti-inflamatório de nanopartículas de Punica granatum Linné sobre a linhagem de monócitos humanos THP-1

• Processo: 19/01380-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Vanessa Soares Lara
• Beneficiário: Priscila Maria Aranda Salomão
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/03965-2 - Papel do sistema renina-angiotensina em diferentes modelos inflamatórios orais: uma abordagem interdisciplinar experimental e clínica, AP.TEM
• Assunto(s): Patologia Monócitos Candidose Candida albicans Estomatite protética
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cândida Albicans | Candidose | Estomatite protética | monócitos | Punica granatum | Patologia

Resumo

Este estudo avaliará in vitro se o fármaco fitoterápico Punica granatum Linné, que afeta o sistema renina-angiotensina (SRA), apresenta também alguma influência nos mecanismos imunopatológicos desencadeados nas candidoses, em especial na forma mais frequente de candidose bucal, a estomatite protética. Especificamente, este estudo tem como objetivo avaliar in vitro se o fitoterápico citado, na forma de nanopartículas, interfere na resposta imunoinflamatória de monócitos frente a infecção com Candida Albicans. Inicialmente, a citotoxicidade dos monócitos humanos da linhagem THP-1 ATCC® em diferentes concentrações de nanopartículas do fitoterápico será avaliada, por meio do ensaio de viabilidade Alarmablue. O efeito anti-inflamatório do composto sobre os monócitos humanos, previamente estimulados in vitro com C. albicans ou LPS, será avaliado pela produção de óxido nítrico (NO) e peróxido de hidrogênio (H2O2), por meio do método colorimétrico de Griess e pela degradação de substratos fluorescentes, respectivamente, bem como por meio da quantificação de citocinas e quimiocinas produzidas pelas células por ensaio Multiplex Milliplex®. Ainda, a determinação de genes e proteínas relacionados com as respostas inflamatória e anti-Candida será avaliada por meio das técnicas RT-qPCR e espectrometria de massas. Os resultados obtidos serão submetidos à análise de normalidade por meio do teste de Kolmogorov-Smirnov e, posteriormente, serão avaliados utilizando-se os testes T e Anova one-way quando os dados apresentarem distribuição normal, ou por meio dos testes de Mann-Whitney e Kruskall-Wallis se os dados forem não-paramétricos (p<0,05).