Papel dos miRNA na alteração da produção de citocinas em células tronco mesenquimais induzida pela sepse

• Processo: 19/05530-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2021
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Francisco Garcia Soriano
• Beneficiário: Andressa Maria Pereira Sargiani
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/04138-2 - Sepse e tolerância ao Lipopolissacarídeo - papel da tolerância regulando o estresse oxidativo e suas consequências sobre a função mitocondrial, nitrosilação protéica e alterações do DNA, AP.TEM
• Assunto(s): Células-tronco mesenquimais Lipopolissacarídeos Receptor 4 toll-like Endotoxemia Resposta inflamatória Emergências
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células tronco mesenquimais | miRNA | sepse | Emergências Clínicas

Resumo

As células-tronco mesenquimais (CTMs) são células com grande capacidade de proliferação, autorrenovação e diferenciação em diferentes linhagens celulares mais especializadas. Essa população de células-tronco adultas é de fácil obtenção e devido as suas características imunomoduladoras e antimicrobianas têm sido uma forte candidata a ser um novo instrumento terapêutico para tratar a sepse. Neste contexto, estudos preliminares em nosso laboratório mostraram que o ambiente in vivo de 8 horas de septicemia induzido por ligação e perfuração cecal (CLP) não interferiu na morfologia celular e nas características proliferativas e senescência dessas células. No entanto, as células provenientes de animais sépticos produziram menos citocinas e quimiocinas quando mantidas em cultura por 48 horas. Das 32 proteínas avaliadas, 28 tiveram sua expressão diminuída nas células sépticas. Sabemos que tanto a resposta imune inata quanto a adaptativa são altamente controladas, e estudos recentes lançaram luz sobre a regulação epigenética nesse complexo sistema de defesa. O papel relevante dos miRNA na diferenciação das CTM em diferentes tipos celulares já foi descrito por diversos grupos. No entanto não existem estudos mostrando os mecanismos envolvidos na produção diminuída de mediadores inflamatórios por células tronco mesenquimais proveniente de animais sépticos. Por esse motivo, no presente projeto iremos estudar o papel dos miRNAs nesta modulação. Para tanto, células tronco mesenquimais provenientes de medula óssea de animais sham e submetidos a CLP serão mantidas em cultura e analisaremos os miRNAs expressos através da técnica de PCRArray. A modulação da expressão de miRNAs será confirmada por PCR em tempo real e o envolvimento dos mesmos será testada utilizando inibidores e miméticos dos miRNAs. (AU)