Caracterização da Ts20, uma nova proteína de provável interesse biotecnológico presente na peçonha de Tityus serrulatus

• Processo: 20/09434-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2020
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2021
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Eliane Candiani Arantes Braga
• Beneficiário: Marco Cezar Camargo Carmona
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Citotoxicidade Tityus serrulatus Cromatografia de fase reversa Cromatografia líquida Espectrometria de massas Técnicas in vitro Biotecnologia Caracterização
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: atividade antiviral | citotoxicidade | Tityus serrulatus | Ts20 | Toxinas animais

Resumo

O escorpionismo tem grande relevância no Brasil, sendo responsável pela maioria dos acidentes envolvendo animais peçonhentos no país e por causar diversos sintomas graves, que podem levar a óbito. A espécie de escorpião Tityus serrulatus representa uma séria ameaça à saúde humana no Brasil, está entre os animais que produzem as peçonhas mais perigosas para mamíferos representando a maior porcentagem de acidentes. A composição da peçonha apresenta uma ampla gama de componentes, principalmente neurotoxinas com ação em canais iônicos e diversos compostos que ainda não foram isolados e/ou estudados. Portanto, este trabalho visa realizar a purificação e caracterização de uma nova proteína presente na fração 45 obtida da cromatografia de fase reversa (C-18) da peçonha de Tityus serrulatus, denominada de Ts20. Para isso, primeiramente, a peçonha será fracionada por cromatografia líquida rápida de proteína (Fast Protein Liquid Chromatography - FPLC), em coluna de fase reversa C-18. Em seguida, a fração de interesse (Fração 45) será submetida a uma eletroforese em gel de poliacrilamida para verificar seu grau de pureza. Posteriormente, será realizado o sequenciamento amino terminal da proteína por degradação de Edman e sua massa molecular será determinada por espectrometria de massas (MALDI-TOF). Para caracterizá-la funcionalmente, a Ts20 será submetida ensaios para detectar possíveis atividades citotóxica, por meio da técnica do MTT, e antiviral in vitro. Adicionalmente será avaliada sua capacidade de inibir proteases. Este trabalho poderá contribuir para esclarecer a relevância desta proteína na peçonha, contribuindo para um melhor entendimento do quadro do envenenamento pelo escorpião Tityus serrulatus, bem como permitirá avaliar o potencial da Ts20 como uma nova molécula com atividade antiviral.