Identificação de espécies causadoras da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) por PCR-RFLP e PCR com posterior sequenciamento, tendo como alvo o gene ITS1o como alvo o gene ITS1

• Processo: 20/14820-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2021
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Saúde Coletiva - Saúde Pública
• Pesquisador responsável: Lúcia Maria Almeida Braz
• Beneficiário: Helen Lucila de Sá Oliveira
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Doenças negligenciadas Leishmaniose cutânea Diagnóstico clínico Técnicas de diagnóstico molecular Reação em cadeia por polimerase (PCR) Análise do polimorfismo de comprimento de fragmentos amplificados
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: definicao de especie | Its1 | ITS1 sequencing | leishmaniose tegumentar | Pcr-Rflp | doencas negligenciadas

Resumo

A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma doença infecciosa, crônica, não contagiosa e de manifestação cutânea, causada pelo protozoário do gênero Leishmania, sendo uma zoonose comum ao homem e animais e um grave problema de saúde pública em vários países. O desenvolvimento de protocolos eficientes no diagnóstico da leishmaniose tegumentar é fundamental para o tratamento da doença; neste cenário destaca-se a PCR (reação em cadeira da polimerase) por ser uma técnica simples, com maior especificidade e sensibilidade do que métodos diagnósticos convencionais, podendo ser realizada a partir de qualquer amostra biológica. Objetivo: Comparar as técnicas moleculares por PCR-RFLP tendo como alvos os genes ITS-1 e Hsp70, no diagnóstico por espécie da leishmaniose tegumentar americana (LTA). Metodologia: Amostras procedentes de biópsias de pacientes, com suspeita de LTA, do Instituto de Infectologia Emílio Ribas e da FIOCRUZ de Pernambuco, terão o DNA extraído submetido à técnica de PCR convencional (tendo como alvo o gene ITS-1), seguida de RFLP e sequenciamento dos amplificados obtidos. Deste modo, será avaliado o diagnóstico da LTA e a capacidade de definição de espécies causadoras da LTA pelas referidas técnicas.