Caracterização das proteínas quinases envolvidas no controle da tradução, metabolismo e secreção de vesículas extracelulares em tripanosomatídeos

• Processo: 21/12883-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Sergio Schenkman
• Beneficiário: Nadjania Saraiva de Lira Silva
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/07870-4 - Mecanismos de adaptação de tripanossomatídeos ao hospedeiro através de controle da transcrição, síntese proteica e secreção de vesículas extracelulares, AP.TEM
• Assunto(s): Biologia celular Biologia molecular Proteínas quinases Vesículas extracelulares Endocitose Tripanossomíase Metabolismo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Endocitose | metabolismo | secreção | Tradução | Trypanosoma | Vesícula | Biologia Celular e Molecular de Parasitas

Resumo

O principal objetivo deste projeto e que será desenvolvido pelo pós-doutorando neste período será relacionado a controle da tradução e formação de grânulos de RNA e a relação destes processos com a secreção de vesículas extracelulares por Trypanosoma. Para isto pretendemos: 1) gerar parasitas contendo a TcK1, K2 e K3 contendo etiquetas (Tags) por CRISPR/Cas9. Estes parasitas serão utilizados para localização destas proteínas em parasitas submetidos a diferentes estresses e para realizar experimentos de co-imunprecipitação para identificar seus substratos e reguladores; 2) detectar a formação e a composição de grânulos de RNA (proteínas e RNAs) a partir de parasitas etiquetados em proteínas descritas e nos nocautes da TcK1, TcK2 e de superexpressores de TcK3; 3) verificar se os nocautes da TcK1, TcK2 afetam a secreção de vesículas extracelulares; 4) gerar mutantes de proteínas envolvidas nas vias de secreção do T. cruzi de maneira sistemática e analisar os efeitos nos processos de endocitose e de secreção de vesículas nos diferentes estágios do T. Cruzi; 5) detectar alterações no proteoma total e de superfície dos parasitas com as diferentes mutações; 6) caracterizar as vesículas extracelular liberadas em todos os casos. (AU)